透明質(zhì)酸鉍的制備、表征及活性研究.pdf

1、背景和目的:消化性潰瘍疾病是一種慢性消化系統(tǒng)疾病，發(fā)病率較高。研究表明，消化性潰瘍的發(fā)病主要是胃腸道黏膜的侵襲因素和保護(hù)因素失衡所致。幽門螺桿菌(H.pylori)感染是主要的侵襲因素。鉍劑因兼具抗H.pylori活性和黏膜保護(hù)活性，因而在消化性潰瘍的治療中獲得廣泛應(yīng)用。透明質(zhì)酸(HA)是一種由N-乙酰氨基葡糖和葡糖醛酸雙糖重復(fù)單位形成的糖胺聚糖，具有多種生物活性，如構(gòu)成多種基質(zhì)、保水及潤滑、創(chuàng)傷愈合等。HA及其衍生物在醫(yī)藥領(lǐng)域獲得廣泛

2、應(yīng)用。HA的金屬配合物近年來也受到人們的重視。為獲得應(yīng)用于治療消化性潰瘍的新型鉍化合物，本課題制備了透明質(zhì)酸鉍配合物，對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征，并對其抗H.pylori活性和抗?jié)兓钚赃M(jìn)行了研究。 方法：以三種不同Mr(分別為1.24×106、6.75×105、2.40×105)的HA和硝酸鉍為原料，制備了三種透明質(zhì)酸鉍配合物(Bi3+-hyaluronate complex，BiHA)，并采用元素分析、13C-NMR、FT-IR、C

3、D、DSC-TGA、XRD、XPS對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。采用瓊脂稀釋法檢測了BiHA對三種H.pylori國際標(biāo)準(zhǔn)株的最小抑菌濃度(MIC)，通過透射電鏡觀察了BiHA對且pylori超微結(jié)構(gòu)的作用，采用流式細(xì)胞術(shù)觀察了BiHA對H.pylori細(xì)胞周期的影響。采用醋酸致慢性胃潰瘍模型、酸化乙醇致急性胃黏膜損傷模型、阿司匹林致急性胃黏膜損傷模型檢測了BiHA的抗?jié)兓钚?。并對其促潰瘍愈合的作用機(jī)制進(jìn)行了探討。 結(jié)果：精制后的BiH

4、A為白色無定形粉末，溶于水中形成高黏度的堿性膠體溶液。BiHA分子中，Bi3+與雙糖重復(fù)單位(C14H20O11N)的摩爾比約為0.8:1。HA中的-OH、-NH2和-COO-參與與Bi3+的配位。形成配合物后，糖胺聚糖鏈的構(gòu)象發(fā)生了變化，Bi3+高度分散于糖胺聚糖鏈上。BiHA的熱化學(xué)性質(zhì)與HA有明顯差別。XPS進(jìn)一步確證了Bi3+與HA形成配合物，配位原子為N原子、O原子。三種BiHA及枸櫞酸鉍鉀(BPC)對三種H.pylori標(biāo)準(zhǔn)

5、株的MIC均為5μg/ml，提示BiHA的體外抗菌活性與BPC相近。在BiHA的作用下，H. pylori的胞質(zhì)均勻度下降，出現(xiàn)凝結(jié)物，且有大量的球形體出現(xiàn)，與BPC對H. pylori超微結(jié)構(gòu)的作用相似。BiHA和BPC均能夠使H. pylori的增殖阻滯于G1期，從而抑制H.pylori的增殖。三種BiHA中，以Mr為1.24×106、6.75×105的HA為原料制備的BiHA均能夠促進(jìn)慢性胃潰瘍的愈合，且能提高潰瘍愈合質(zhì)量，其作用