中國漢族人群KLKB1和TERT基因與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、本文研究工作分為兩部分： 第一部分：目的(KLKB1)：基于HapMap計劃中國人群(CHB)的數(shù)據(jù)，采用標(biāo)簽SNP方法在中國漢族原發(fā)性高血壓病例一對照人群中對KLKB1基因多態(tài)進行了研究。 材料和方法(KLKB1)：所有DNA樣本和臨床資料均來自亞洲國際心血管病協(xié)作研究(TheIntemational Collaborative Study of Cardiovascular Disease in Asia，Inter

2、ASLA)中國部分，研究對象包括北京、吉林、山東、陜西4個省市的1317名高血壓患者(收縮壓≥150mmHg和/或舒張壓>95mmHg和/或研究對象正在接受抗高血壓藥物治療)和按照地區(qū)、性別和年齡匹配的1269名健康對照。排除了有繼發(fā)性高血壓、冠心病、糖尿病、腦卒中、嚴(yán)重肝腎疾病和惡性腫瘤患者。參加者均詳細填寫調(diào)查表，包括疾病個人史、家族史、吸煙與飲酒史和藥物使用情況，并測量血壓、身高、體重、腰圍及臀圍以及脂質(zhì)水平等各項生化指標(biāo)。所有研

3、究對象均為漢族且無血緣關(guān)系。從HapMap網(wǎng)站下載KLKB 1基因序列范圍內(nèi)的45個中國人的SNPs信息，選擇常見SNP計算連鎖不平衡狀態(tài)并構(gòu)建單體型，通過tagSNPs和htSNP2軟件包選擇標(biāo)簽SNP。使用PCR-RFLP方法對2586例研究對象進行基因型鑒定。t檢驗x<'2>檢驗用于單變量分析，非條件Logistic回歸分析用于檢驗多態(tài)位點與表型的獨立關(guān)聯(lián)及與環(huán)境因素的交互作用，以上分析過程由Stata 8.0來完成。應(yīng)用Hapl

4、o.stats軟件分析調(diào)整環(huán)境因素后單體型與表型的關(guān)聯(lián)。Genasso用于預(yù)測其他未作基因分型的SNPs與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)關(guān)系。 結(jié)果(KLKB1)：病例組和對照組的性別、年齡、吸煙率和飲酒率均無顯著性差異。在HapMap數(shù)據(jù)庫中，KLKB1基因區(qū)域內(nèi)CHB人群共有8個常見SNPs，根據(jù)htSNP2和tagSNP程序的計算結(jié)果，選擇rs2278542、rs2304595、rs4253325和rs925453做為標(biāo)簽SNP。單變

5、量分析結(jié)果顯示rs2304595和rs4253325與高血壓的發(fā)生顯著關(guān)聯(lián)。與單個SNP分析結(jié)果一致，攜帶有rs2304595 G等位基因和rs4253325 A等位基因的兩種單體型Hap1(AGAC)和Hap3(CGAC)顯著增加了高血壓發(fā)生的危險。與單體型Hap2(CAGC)相比，調(diào)整后的OR值分別為1.37(95％CI 1.29-1.45，.P<0.0001)和1.17(95％CI 1.02-1.34，P=0.028)。飲酒和基因

6、之間存在著顯著的交互作用，在飲酒人群中Hapl(AGAC)相對于Hap2(CAGC)的OR值增加為2.50(95％CI，2.40 to 2.6 1，P<0.0001). 結(jié)論(KLKB1)：首次開展了KLKB1基因與高血壓的關(guān)聯(lián)研究，結(jié)果顯示KLKB1基因的常見變異可能會增加中國北方漢族人群高血壓發(fā)生的危險性。 第二部分：目的：將TERT基因啟動子區(qū)作為研究的重點，在中國漢族人群中探索TERT基因啟動子區(qū)多態(tài)變異與高血壓

7、發(fā)生的關(guān)系。 材料和方法(TERT)：所有DNA樣本和臨床資料均來自InterASIA研究中國部分，研究對象包括北京、吉林、山東、陜西4個省市的1317名高血壓患者(收縮壓≥150mmtHg和/或舒張壓≥95mm5Hg和/或研究對象正在接受抗高血壓藥物治療)和按照地區(qū)、性別和年齡匹配的1269名健康對照。研究對象排除了有繼發(fā)性高血壓、冠心病、糖尿病、腦卒中、嚴(yán)重肝腎疾病和惡性腫瘤患者。參加者均詳細填寫調(diào)查表，包括疾病個人史、家族

8、史、吸煙與飲酒史和藥物使用情況，并測量血壓、身高、體重、腰圍及臀圍以及脂質(zhì)水平等各項生化指標(biāo)。選擇TERT基因啟動子區(qū)2個多態(tài)位點rs2736109和rs2735940，使用PCR-RFLP方法對2586例研究對象進行基因型鑒定。t檢驗及x<'2>檢驗用于單變量分析，非條件Logistic回歸分析用于檢驗多態(tài)位點與表型的獨立關(guān)聯(lián)及與環(huán)境因素的交互作用，以上分析過程由Stata8.0來完成。應(yīng)用Haplo.stats軟件分析調(diào)整環(huán)境因素后

9、單體型與表型的關(guān)聯(lián)。所有檢驗都為雙側(cè)檢驗。 結(jié)果(TERT)：病例組和對照組的性別、年齡、吸煙率和飲酒率均無顯著性差異。兩個位點的基因型分布在總體、病例和對照組中均符合Hardy-Weinberg平衡。rs2736109和rs2735940的基因型分布在病例和對照中差異均無顯著性(rs2736109：P=0.794：rs2735940：P=0.390)。rs2736109和rs2735940兩個多態(tài)位點之問連鎖不平衡程度較強(D