血液抗-HCV ELISA篩查試劑盒的比較及其質(zhì)控血清的制備.pdf

1、目的：丙型肝炎病毒（Hepatitisc Virus，HCV）是導致輸血后肝炎的一個重要病因。輸血和血制品是丙型肝炎病毒最主要的傳播途徑，調(diào)查表明，輸血后病毒性肝炎患者血清中抗-HCV陽性率高達80％以上，已成為大多數(shù)輸血后肝炎的原因?？?HCV陽性的獻血者是傳播丙肝的最危險的傳染源。目前，全國采供血機構主要采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）篩查丙型肝炎病毒抗體，衛(wèi)生部規(guī)定采供血機構對獻血者血液的抗-HCV篩查必須進行兩次檢測，而且兩次

2、檢測使用的試劑必須是不同廠家的試劑，研究表明：各種試劑之間在靈敏度和特異性存在著差異。
　　 本課題的目的是：1）評價國內(nèi)近兩年來常用的四種抗-HCV ELISA試劑盒的檢測特點。2）采用HCV抗體分片段酶聯(lián)免疫確認試劑進行分片段檢測，制備出能對試劑進行質(zhì)量評價的一套質(zhì)控血清，為日常工作中選擇最佳組合的試劑盒提供質(zhì)量保證。
　　 方法：
　　 1.本課題所確定的研究對象為邯鄲地區(qū)無償獻血人群，對2006年我站使用

3、不同廠家抗-HCV ELISA試劑盒對45150名無償獻血者丙肝抗體篩檢的情況進行統(tǒng)計分析。
　　 2.收集2006年1月至12月無償獻血者抗-HCV篩查陽性的原料血漿（5ml）及相應的檢測標本359，-30℃以下冰凍保存。
　　 3.在359例陽性標本中，隨機選出只有一種ELISA試劑篩查陽性的標本20例做HCV RNA檢測，隨機選兩種及兩種以上ELISA試劑篩查陽性的標本60例做HCV RNA檢測。
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4、.對經(jīng)RT-PCR的標本，采用HCV抗體分片段酶聯(lián)免疫確認試劑進行分片段檢測。
　　 5.對各種不同片段陽性的原料血漿進行病毒滅活、分裝，以作為日常工作中選擇最佳組合的試劑質(zhì)控品。
　　 結果：
　　 1.我國平均HCV感染率3.2％[2]，邯鄲地區(qū)無償獻血者人群抗-HCV陽性的報廢率為0.79％，說明：無償獻血人群是低危人群。
　　 2.四種不同廠家的試劑盒，用衛(wèi)生部臨檢中心的標準質(zhì)控血清盤進行檢測，它

5、們都能達到國家標準：符合率>95％。
　　 3.分別使用A與B、A與C、A與D試劑進行HCV篩查的檢測情況的統(tǒng)計分析表明：p<0.01，差異顯著具有統(tǒng)計學意義。
　　 4.20例一種試劑盒篩查陽性的標本HCV RNA檢測結果均陰性；60例兩種以上試劑盒篩查陽性的標本HCV RNA檢測結果：41份為陽性，19份為陰性。說明ELISA法與PCR法檢測丙型肝炎結果也存在差異。
　　 5.使用丙肝病毒抗體分片段酶聯(lián)免疫試

6、劑盒測定20例ELISA單一試劑篩查陽性且HCV RNA陰性的標本，結果為：除1例NS3單片段陽性判為可疑外，其它都為陰性；使用丙肝病毒抗體分片段酶聯(lián)免疫試劑盒測定41例兩種以上試劑篩查陽性且HCV RNA陽性的標本，結果為：檢出8種不同陽性片段組合的標本，NS3區(qū)檢出率最高40例，其次為C區(qū)35例，NS4區(qū)與NS5區(qū)分別檢出23例和19例。
　　 結論：
　　 1.不同廠家生產(chǎn)的抗-HCV試劑盒在靈敏度、特異性上存在差