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文檔簡介
1、玉米穗腐病是世界上為害較重的玉米病害之一,造成重大的經(jīng)濟損失,危害人畜健康。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)玉米穗腐病的致病菌有30多種,鐮孢是玉米穗腐病的主要致病菌,其中擬輪生鐮孢為害較為嚴重。伏馬毒素主要由擬輪生鐮孢產(chǎn)生,有致畸、致癌作用。本文調(diào)查了2012年我國九?。ê颖薄⑸轿?、內(nèi)蒙古、四川、云南、貴州、寧夏、遼寧及黑龍江)共250份玉米籽粒樣品中鐮孢的發(fā)生及分布,研究了不同因素(氮源、碳源、殺菌劑及綠原酸)對擬輪生鐮孢產(chǎn)生伏馬毒素的影響,對玉米穗腐
2、病的防治具有重要意義。主要取得以下結果:
1.采用形態(tài)學方法和分子生物學方法分離鑒定玉米籽粒中的鐮孢。共分離得到2271株(20.2%)鐮孢,包括禾谷鐮孢(1121株)、擬輪生鐮孢(928株)、膠孢鐮孢(115株)、層出鐮孢(92株)、尖孢鐮孢(9株)、木賊鐮孢(4株)和厚垣鐮孢(2株)。不同地區(qū)鐮孢的分離頻率分別為39.2%(貴州)、32.1%(云南)、25.0%(山西)、22.9%(遼寧)、21.6%(河北)、20.0%(
3、黑龍江)、16.0%(四川)、9.4%(寧夏)、3.8%(內(nèi)蒙古)。其中擬輪生鐮孢是遼寧(17.6%)、四川(13.6%)、河北(11.1%)、寧夏(6.5%)的優(yōu)勢菌株;禾谷鐮孢是云南(26.8%)、貴州(24.7%)和山西(23.6%)的優(yōu)勢菌株;膠孢鐮孢是黑龍江的優(yōu)勢菌株;內(nèi)蒙古樣品中擬輪生鐮孢、膠孢鐮孢和禾谷鐮孢的分離頻率相同。
2.不同氮源、碳源對擬輪生鐮孢的生長及毒素產(chǎn)生影響不同。離體條件下分析了五種氮源(牛肉膏、
4、蛋白胨、硝酸鉀、硫酸銨、谷氨酸)、七種碳源(山梨醇、甘露醇、蔗糖、麥芽糖、葡萄糖、果糖、可溶性淀粉)對擬輪生鐮孢生長及伏馬毒素產(chǎn)生的影響,發(fā)現(xiàn)氮源能影響菌株的菌落形態(tài),而碳源對菌株的菌落形態(tài)沒有明顯影響。氮源為硝基氮、碳源為甘露醇和麥芽糖時,較適合擬輪生鐮孢菌絲生長;氮源為牛肉膏、碳源為甘露醇時,較適合擬輪生鐮孢產(chǎn)生伏馬毒素。伏馬毒素含量隨氮源濃度增加而減少,隨碳源濃度的增加而增加。分析不同培養(yǎng)基接菌前后pH變化發(fā)現(xiàn),強酸條件下抑制菌株
5、生長及伏馬毒素的產(chǎn)生,而弱酸條件下,適合菌株產(chǎn)生伏馬毒素。
3.殺菌劑對菌株生長均有一定的抑制作用,但對伏馬毒素的影響具有差異。離體條件下研究了四種殺菌劑(多菌靈、百菌清、吡唑醚菌酯和氰烯菌酯)對擬輪生鐮孢生長、伏馬毒素產(chǎn)生及FUM1基因表達的影響,發(fā)現(xiàn)這四種殺菌劑對擬輪生鐮孢菌絲生長及孢子萌發(fā)均具有一定的抑制作用,對菌絲生長的EC50分別為0.41、1.19、2.49、4.22μg/mL,對孢子萌發(fā)的EC50分別為3.65、
6、0.95、0.94、0.72μg/mL。擬輪生鐮孢在含有殺菌劑的培養(yǎng)基上生長時,培養(yǎng)6d時四種殺菌劑均能有效抑制擬輪生鐮孢產(chǎn)生伏馬毒素;培養(yǎng)10d時僅吡唑醚菌酯能夠有效抑制菌株產(chǎn)生伏馬毒素,其他藥劑低濃度(小于EC50)促進伏馬毒素的產(chǎn)生,而高濃度(大于等于EC50)抑制毒素的積累。RT-PCR分析四種殺菌劑對伏馬毒素合成關鍵基因FUM1表達的影響,發(fā)現(xiàn)百菌清和氰烯菌酯均能有效抑制FUM1基因表達,而多菌靈和吡唑醚菌酯在低濃度下促進FU
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