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1、背景:心臟交感神經(jīng)的激活在心血管疾病的病理生理過(guò)程中起著重要的作用,常用的檢測(cè)交感神經(jīng)遞質(zhì)釋放的方法,包括微透析技術(shù)和同位素稀釋法等方法不能實(shí)時(shí)地記錄心臟去甲腎上腺素(NE)的釋放。恒壓安培法(Amperometry)是一種電化學(xué)方法,對(duì)組織損傷小且具有較高的時(shí)間和空間分辨率。本學(xué)位論文首先設(shè)計(jì)出適用于心臟在體(in vivo)記錄的新方法,在家兔心臟上用安培法在體記錄誘發(fā)的NE釋放。 目的:通過(guò)對(duì)原有的碳纖電極(CFE)技術(shù)的
2、改進(jìn),創(chuàng)建一種用安培法在體記錄心臟交感神經(jīng)NE釋放的新實(shí)驗(yàn)方法,并研究缺氧和交感興奮誘導(dǎo)的心室NE釋放信號(hào)。 方法:1.日本大耳白兔心包懸吊法暴露心臟,固定裝置固定心臟。2.我與呂靖、修蕓同學(xué)改造了現(xiàn)有的玻璃CFE,使用金絲制成聚乙烯固定式金電極(GFE)和浮動(dòng)式GFE。在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,我設(shè)計(jì)了創(chuàng)新的浮動(dòng)電極專(zhuān)用記錄支架,使GFE電極能夠穩(wěn)定地檢測(cè)到缺氧或電刺激神經(jīng)誘導(dǎo)的來(lái)自位于心室內(nèi)微米區(qū)域內(nèi)交感神經(jīng)末梢釋放的NE信號(hào)。3.創(chuàng)
3、建雙通道浮動(dòng)式GFE同時(shí)記錄心臟左右心室NE釋放的方法。 結(jié)果:1.體外實(shí)驗(yàn)顯示GFE能夠定量檢測(cè)到NE釋放,具有良好的信噪比。2.CFE能夠記錄到短暫窒息誘導(dǎo)的心交感神經(jīng)NE釋放,重復(fù)性良好,發(fā)現(xiàn)重復(fù)窒息缺氧誘發(fā)心神經(jīng)NE釋放量逐漸減少的現(xiàn)象。3.GFE能夠記錄缺氧或電刺激頸部交感神經(jīng)(SG)和副交感神經(jīng)(VN)誘導(dǎo)的心交感神經(jīng)NE釋放,重復(fù)性良好。4.浮動(dòng)式GFE能夠記錄電刺激SG和VN誘導(dǎo)心交感神經(jīng)末梢NE的釋放,發(fā)現(xiàn)GF
4、E記錄的信號(hào)是包含心電和NE的混合信號(hào)。5.浮動(dòng)式GFE雙通道記錄出刺激頸部SG誘導(dǎo)左右心室交感神經(jīng)NE的釋放。 結(jié)論:本學(xué)位研究過(guò)程中設(shè)計(jì)出了固定式GFE和浮動(dòng)式GFE兩種實(shí)驗(yàn)記錄方法,兩種方法均能夠有效地記錄心肌NE的釋放。特別是,浮動(dòng)式GFE的方法簡(jiǎn)單、實(shí)用、重復(fù)性好、對(duì)組織損傷小,可以應(yīng)用于研究生理或病理狀態(tài)下心臟交感神經(jīng)NE釋放信號(hào)。應(yīng)用這項(xiàng)創(chuàng)新的在體記錄技術(shù),我與呂靖、修蕓同學(xué)一起第一次在家兔心室上在體實(shí)時(shí)記錄到誘發(fā)
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