尼克酰胺N-甲基化酶高表達(dá)的人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的構(gòu)建.pdf

1、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文尼克酰胺N甲基化酶高表達(dá)的人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的構(gòu)建姓名：何曉紅申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：謝鑫友20100501浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要pcDNA31NNMT。通過脂質(zhì)體法將pcDNA31NNMT穩(wěn)定轉(zhuǎn)染于大腸癌細(xì)胞株SW480，成功構(gòu)建了NNMT高表達(dá)的大腸癌細(xì)胞株SW480模型，研究NNMT的表達(dá)變化對SW480生長曲線、細(xì)胞周期等的影響。結(jié)果限制性內(nèi)切酶和DNA測序結(jié)果表明，編碼

2、NNMT蛋白的DNA序列準(zhǔn)確插入到pcDNA31()多克隆位點(diǎn)，成功構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA31NNMT；RTPCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染NNMT的SW480細(xì)胞中NNMTmRNA表達(dá)量明顯上調(diào)，Westernblot可見清晰NNMT蛋白條帶，空載組和對照組則不表達(dá)該蛋白，提示NNMT高表達(dá)人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480(SW480pcDNA31／NNMT)構(gòu)建成功；SW480pcDNA31／NNMT細(xì)胞生長速度明顯快于其他兩組細(xì)胞，其生長曲線發(fā)生一