柑橘采后生防菌34-9及γ-60-11固體發(fā)酵工藝研究.pdf

1、柑橘的采后病害是引起柑橘腐爛的主要原因，常會(huì)導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失，化學(xué)殺菌劑是控制柑橘采后病害的主要手段，但長(zhǎng)期大量使用化學(xué)殺菌劑會(huì)對(duì)人體健康及環(huán)境造成危害，同時(shí)也導(dǎo)致柑橘致病菌產(chǎn)生抗藥性，從而降低防治效果因此，迫切需要生產(chǎn)一些新的、高效無(wú)毒的生物保鮮劑，以逐步取代化學(xué)殺菌劑在柑橘上的使用。 目前，生防菌多采用液體深層發(fā)酵技術(shù)，對(duì)設(shè)備要求高，生產(chǎn)工藝復(fù)雜，成本高；而固體發(fā)酵采用的原料一般是廉價(jià)的農(nóng)副產(chǎn)品，設(shè)備也較液體發(fā)酵簡(jiǎn)單。發(fā)酵

2、產(chǎn)品經(jīng)簡(jiǎn)單處理即可得到固體菌劑，生產(chǎn)成本低于液體發(fā)酵。本試驗(yàn)對(duì)檸檬形克勒克酵母菌34-9及其誘變菌株γ-60-11固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵條件進(jìn)行了研究，篩選出適合檸檬形克勒克酵母菌34-9及其誘變菌株γ-60-11固體發(fā)酵生產(chǎn)的培養(yǎng)基配方，并對(duì)培養(yǎng)基配方進(jìn)行優(yōu)化，明確了其發(fā)酵工藝條件。為研制有效的生物防治菌劑提供科學(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下: 1.研究了菌種特性，確定了最佳種子液濃度以及培養(yǎng)時(shí)間:分析了檸檬型克勒克酵母的主要組成成分

3、。研究了34-9和γ-60-11在豆芽汁液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)，確定了種子液最佳培養(yǎng)時(shí)間，34-9為14h，γ-60-11為16h，種子液濃度均為5×108個(gè)/mL。 2.篩選出固體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基配方:在搖瓶固體發(fā)酵基礎(chǔ)上，34-9固體培養(yǎng)基配方為麩皮:玉米粉:豆粕=1:4:1，葡萄糖30g/kg，(NH4)2SO49g/kg，KH2PO49g/kg，蛋白胨5g/kg；MgS04·7H2O2.4g/kg，ZnSO4·7H2O0

4、.4g/kg，CaCl2·2H2O0.12g/kg，生物素0.1mg/kg，泛酸鈣30mg/kg，核黃素6mg/kg。 γ-60-11固體發(fā)酵的培養(yǎng)基配方為麩皮:玉米粉:豆粕=1:3:2；葡萄糖30g/kg，(NH4)2SO49g/kg，NaH2PO49g/kg，蛋白胨10g/kg；MgSO4·7H2O2.4g/kg，ZnSO4·7H2O0.4g/kg，MnSO4·7H2O0.02g/kg，CaCl2·2H2O0.12g/kg，

5、生物素0.1mg/kg，肌醇3mg/kg，硫胺素6mg/kg，核黃素0.6mg/kg。 3.獲得了適宜的搖瓶固體發(fā)酵條件:對(duì)不同溫度、不同發(fā)酵時(shí)間、不同接種量、不同料水比分別進(jìn)行了試驗(yàn)，優(yōu)化了發(fā)酵條件。34-9發(fā)酵溫度為30℃，發(fā)酵時(shí)間32h，接種量15％，料水比1:1；γ-60-11發(fā)酵溫度為28℃、發(fā)酵時(shí)間28h，接種量15％，料水比1:1；研究還表明在一定范圍內(nèi)，隨著接種量的增加，34-9和γ-60-11的生物量明顯的提高