基于TGF-β-Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路探討盆炎灌腸方治療盆腔炎性疾病后遺癥慢性盆腔痛止痛機(jī)理.pdf

1、目的:基于細(xì)胞內(nèi)TGF-β/Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路探討盆炎灌腸方治療盆腔炎性疾病后遺癥慢性盆腔痛止痛機(jī)理，為盆炎灌腸方的臨床廣泛應(yīng)用提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　方法:選用離體培養(yǎng)的人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞，傳代培養(yǎng)，以中藥盆炎灌腸方對(duì)細(xì)胞作用的最大無(wú)毒濃度6.25mg/ml作用于人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞，以加TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體+盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方組作為實(shí)驗(yàn)組，加入細(xì)胞培養(yǎng)基組為對(duì)照組，應(yīng)用雙抗體夾心ABC-ELI

2、SA法檢測(cè)四組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中Smad3和Smad7蛋白的含量變化，應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)四組細(xì)胞中TGF-β1、Smad3、Smad7和Ⅰ型膠原mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:1、與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組三組中Smad3的含量均明顯降低，Smad3在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的含量依次為796.60±180.32pg/ml、1659.92±303.12 pg/ml、2090.88±120.67

3、pg/ml，與對(duì)照組含量2569.82±111.89 pg/ml比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而實(shí)驗(yàn)組三組中Smad7的含量與對(duì)照組比較均明顯升高，Smad7在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的含量依次為68.91±12.62pg/ml、30.62±6.35pg/ml、14.39±1.99pg/ml，與對(duì)照組含量0.97±1.09pg/ml相

4、比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2、實(shí)驗(yàn)組三組中的TGF-β1、Smad3和Ⅰ型膠原mRNA的表達(dá)與對(duì)照組相比均降低，其中TGF-β1mRNA在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的灰度與內(nèi)參灰度比值依次為0.44±0.03、0.91±0.23、1.46±0.26，與對(duì)照組2.19±0.04相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組各組間比較差

5、異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Smad3mRNA在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的灰度與內(nèi)參灰度比值依次為0.54±0.10、1.39±0.10、1.76±0.05，與對(duì)照組2.07±0.14相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Ⅰ型膠原mRNA在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的灰度與內(nèi)參灰度比值依次為0.21

6、±0.02、0.79±0.06、0.87±0.02，與對(duì)照組1.02±0.06相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而實(shí)驗(yàn)組三組中Smad7mRNA與對(duì)照組相比均升高，Smad7mRNA在盆炎灌腸方組、盆炎灌腸方+TGF-β1抗體組、TGF-β1抗體組的灰度與內(nèi)參灰度比值依次為1.23±0.06、1.00±0.15、0.76±0.06，與對(duì)照組0.57±0.05比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)