血塞通注射液藥效物質及其體內(nèi)過程研究.pdf

1、當前，我國中醫(yī)藥基礎研究領域已經(jīng)取得舉世矚目的成就，現(xiàn)代科學理論和技術被應用于中藥現(xiàn)代化研究，極大地促進了現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，使之成為我國戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)。為進一步提升中藥產(chǎn)品的科技競爭力，推進中藥產(chǎn)業(yè)的國際化，使其最終進入國際醫(yī)藥主流市場，必須運用先進的現(xiàn)代科技手段對中藥化學物質組成、中藥藥效物質及其作用機制、中藥多成分藥代動力學等開展深入研究，揭示中藥的科學內(nèi)涵，科學指導中藥產(chǎn)品的臨床應用。
　　血塞通注射液為三七總皂苷提取物制

2、劑，臨床廣泛用于腦血栓、腦梗塞、冠心病、心肌梗塞等心腦血管疾病的治療，并療效確切，是一種具有重大發(fā)展前景的中藥大品種。因此，本論文選擇血塞通注射液為研究載體，圍繞中藥大品種二次開發(fā)中共性關鍵科學問題，運用多學科交叉綜合技術手段，開展中成藥化學物質組成、藥品質量分析方法學、藥效物質基礎及主要成分的體內(nèi)過程等方面研究，著重探索中藥藥效物質基礎、多成分藥代動力學、中藥PK-PD研究等難點問題。學位論文的主要內(nèi)容及學術貢獻如下:
　　1采

3、用HPLC-ESI-MSn定性分析方法研究血塞通注射液化學物質組成，從中鑒定出27個皂苷類成分。
　　2以10種皂苷對照品，研究建立了27種皂苷成分的HPLC定量分析方法，對血塞通注射液中27種成分進行了含量測定。此外，還研究建立了血塞通注射液HPLC指紋圖譜分析方法。在此基礎上，建立了含量測定與指紋圖譜相結合的血塞通注射液質量分析方法，為血塞通注射液全面質量控制提供了方法參考。
　　3研究創(chuàng)建了基于過氧化氫-魯米諾及二苯代

4、苦味酰基-魯米諾化學發(fā)光體系的中藥抗氧化活性組分高通量篩選平臺，進而評價了血塞通注射液主要化學成分的抗氧化活性。此外，還采用體外細胞模型對血塞通注射液及其主要成分的抗氧化損傷及抗缺氧損傷活性進行評價。結果表明，血塞通注射液12個主要皂苷成分均具有抗氧化活性，Rg1及Rb1具有抗心肌細胞缺氧損傷活性，對心肌細胞具有保護作用。
　　4采用心肌缺血大鼠模型進一步研究血塞通注射液主要化學成分Rg1及Rb1的藥效作用。結果表明，Rg1具有顯

5、著的抗心肌缺血作用，是血塞通注射液的主要藥效成分。
　　5采用HPLC-TQMS分析技術，建立了大鼠血漿及組織中R1、Rg1、Re、Rg2、Rh1、Rc、Rb1、Rb2、 Rb3、Rd、20(S)-Rg3和20(R)-Rg312種成分的含量測定方法，進而研究了血塞通注射液所含的這12種皂苷類成分在大鼠體內(nèi)的過程。
　　研究結果顯示，血塞通注射液藥效物質主要分布在腎、肺、肌肉和心臟組織中，表明這些器官及組織是藥效物質作用及累積

6、的主要部位;Rb1在大鼠血液、組織及器官中的暴露程度最大;上述12種成分在大鼠體內(nèi)的藥動學特征分為兩大類，一類是快消除型（包括R1、Rg1、Re、Rg2、 Rh1、SRg3及RRg3），另一類是慢消除型（包括Rc、Rb1、Rb2、Rb3及Rd）。考慮到Rg1是血塞通注射液主要藥效成分，而Rb1在大鼠體內(nèi)暴露程度最大，且Rg1及Rb1分別具有快消除型和慢消除型藥動學行為，可各自代表血塞通注射液中兩大類具不同藥動學特點的皂苷成分，據(jù)此提出在

7、血塞通注射液藥代動力學研究中擇取Rg1和Rb1作為藥代標志物。
　　6對心肌缺血模型大鼠開展代謝組學研究，發(fā)現(xiàn)了大鼠心肌缺血的特征代謝物組，建立了基于代謝組學的中藥藥效評價方法。在此基礎上，提出一種基于代謝組學的中藥藥效動力學與藥代動力學結合研究方法（即中藥PK-PD研究方法）。根據(jù)這一思路，以藥效成分Rg1作為血塞通注射液藥代標志物，采用心肌缺血模型大鼠特征代謝物組評價藥效，開展血塞通注射液PK-PD研究。研究結果顯示，Rg1與