角倍蟲源優(yōu)良品系篩選.pdf

1、角倍是角倍蚜寄生在漆樹科鹽膚木屬植物上所形成的蟲癭，它是五倍子的一種。五倍子因其豐富的單寧含量，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化輕工和食品等領(lǐng)域，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，其中角倍的分布最廣、產(chǎn)量最大，在市場(chǎng)上占據(jù)主導(dǎo)地位。目前，角倍來源主要依賴自然結(jié)倍，部分地區(qū)也建立人工培養(yǎng)基地，但遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求，且其加工不分品級(jí)，尤其是不同種類的五倍子混合處理，資源浪費(fèi)現(xiàn)象明顯，篩選優(yōu)良品系，分等級(jí)對(duì)其有效成分提取利用，成為目前五倍子產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重中之重。形成角倍的

2、蟲源為角倍蚜，屬于昆蟲綱Insecta半翅目 Hemiptera蚜總科 Aphidoidea蚜科 Aphididae五節(jié)根蚜族 Fordini倍蚜屬Schlechtendalia，對(duì)角倍的形成起著決定性的作用。所以角倍優(yōu)良品系的篩選首先是篩選出優(yōu)良的角倍蚜品系，從而提高角倍質(zhì)量和產(chǎn)量。
　　本研究以mtDNA COI(細(xì)胞色素氧化酶I)和Cytb(細(xì)胞色素b)基因序列為分子標(biāo)記，通過對(duì)角倍蚜樣本20個(gè)種群435個(gè)個(gè)體之間的遺傳變異

3、、遺傳結(jié)構(gòu)和單倍型分布及其相互關(guān)系的分析，結(jié)合倍子單寧含量，篩選角倍蟲源的優(yōu)良品系。通過本實(shí)驗(yàn)得到以下研究結(jié)果：
　?。?）共獲得角倍蚜mtDNA兩個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因Cytb和 COI的DNA序列，其基因聯(lián)合序列長度為1,167bp，其中 Cytb基因474bp，變異位點(diǎn) V(Variable sites)15個(gè)(占3.16％)；COI基因693bp，變異位點(diǎn)17個(gè)(占2.46%)；聯(lián)合基因中含保守位點(diǎn)1,135個(gè)(占97.26%)

4、，變異位點(diǎn)32個(gè)(占2.74%)。兩個(gè)基因的密碼子的第一、二位點(diǎn)比較保守，變異主要發(fā)生在第三位點(diǎn)。mtDNA基因的A+T含量(76.3%)明顯高于G+C含量(23.7%)，堿基轉(zhuǎn)換明顯高于顛換，且第三位點(diǎn)的轉(zhuǎn)換/顛換比高于第一第二位點(diǎn)。
　　（2）角倍蚜20個(gè)種群435個(gè)樣本共包含43個(gè)單倍型，其中Hap5為主要單倍型，包含了17個(gè)種群112個(gè)樣本，分布最廣，且為原始單倍型。說明該單倍型能夠在角倍蚜分布區(qū)域的大部分地區(qū)生長、繁殖并

5、且結(jié)倍，是角倍蟲源中的優(yōu)勢(shì)單倍型。
　?。?）遺傳多樣性指數(shù)顯示，丹寨與五峰種群最高，峨眉種群最低。分組后發(fā)現(xiàn)，組內(nèi)的遺傳多樣性范圍較小，單倍型多樣性(Hd)和總核苷酸多樣性(π)均為五組的指數(shù)最高，一組的指數(shù)最低。從角倍蚜對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性角度講，丹寨和五峰種群的角倍蚜可作為優(yōu)良品系人為的引入其他的區(qū)域進(jìn)行繁殖。
　?。?）AMOVA分析結(jié)果顯示，角倍蚜種群內(nèi)的變異高于種群間變異（FST值，P＜0.05)，表明角倍蚜各種群間基

6、因交流貧乏；遺傳距離與地理距離之間存在相關(guān)關(guān)系，說明地理距離包括山川或河流等影響了角倍蚜種群間的基因交流。篩選優(yōu)良品系進(jìn)行人為的引種培養(yǎng)可以促進(jìn)其廣泛的基因交流和倍子品質(zhì)的提高。
　?。?）基于單倍型構(gòu)建的分子聚類關(guān)系(MP和NJ樹)、TCS網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖以及Tajima's D值顯示，角倍蚜單倍型大部分以種群優(yōu)先的關(guān)系聚在一簇，湖北和貴州地區(qū)是角倍蚜種群的起源中心，為祖先類群，是核心種質(zhì)資源，優(yōu)先重點(diǎn)保護(hù)的種群。
　　（6）通