羅漢果優(yōu)良品系的選育及組培快速繁殖.pdf

1、羅漢果(Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey)是廣西重要的經濟作物。羅漢果果實營養(yǎng)價值高,含有豐富的果糖、葡萄糖、蛋白質和多種維生素,其性涼味甘,具有清熱解毒、止咳潤肺等功效,已廣泛應用于醫(yī)藥、飲料和調味品中。羅漢果甜甙甜度高、熱量低、無毒,可作為肥胖病人、糖尿病人、高血壓病人理想的食品添加劑。目前,羅漢果優(yōu)良品種稀少、種性退化、混雜嚴重、產量低、品質差。由于羅漢果為雌雄異株植物,種子實生苗中雄株

2、占70%以上,且難以鑒別,限制了羅漢果良種的有性繁殖。采用扦插、嫁接、壓蔓等無性繁殖方法,不僅繁殖系數(shù)低,且易造成良種的種性退化。在種質有限的條件下不能在生產中大量推廣。而用組織培養(yǎng)快速繁殖的方法,不僅可以加速良種繁育,而且能在一定程度上保持母本的優(yōu)良性狀。迄今為止,國內對羅漢果的組織培養(yǎng)研究主要以無菌實生苗為材料,尚未見有關羅漢果成年植株莖段組織培養(yǎng)的報道。為了建立起一套有效的羅漢果無性快速繁殖體系,本文以羅漢果成年植株的莖段為材料,

3、研究了不同外植體與消毒時間對離體組織培養(yǎng)的影響以及外植體的取材季節(jié)、取材部位、糖分、激素的種類及濃度對芽的形成和生長的影響,探討了在不同無機鹽濃度、蔗糖濃度和誘導溫度條件下,不同暗處理時間以及不同枝條等因素對試管塊莖形成與膨大的影響。此外,還進行了組培苗的生根誘導、扦插、移栽、定植等試驗,適時觀測其大田性狀,并測定了羅漢果甜甙V的含量。試驗結果表明,外植體的取材季節(jié)、取材部位以及消毒時間均影響羅漢果外植體的滅菌效果。羅漢果外植體的采集以

4、4-5月份母株主蔓未上棚前為宜,污染少,存活率為22.2%, 較其他季節(jié)高。同一枝條以中上部莖段較為有利,污染輕,死亡少,存活率為28.3%。用0.1HgCl2消毒時間以10分鐘為宜。于4-6月取材,對芽的誘導比較有利。9-11月份,母株基部新抽的嫩枝比較容易誘導芽的形成。在誘導芽的培養(yǎng)基中,添加蔗糖和葡萄糖各1.5%有利于芽的生長。細胞分裂素6-BA的誘導效果比KT、ZT好,6-BA與NAA配合使用有利于芽的形成和伸長,其中以6-BA

5、0.5mg/L+NAA0.05mg/L的誘導效果最好,所形成的芽粗壯、伸長快、葉色鮮綠。以6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L為繼代培養(yǎng)基,植株生長快,繁殖系數(shù)為4.5。無根<；WP=3>；苗接種于1/2MS+IBA0.1mg/L,附加0.5%活性炭的液體培養(yǎng)基中,生根快,不定根發(fā)育良好。在試管塊莖的誘導中,1/4MS無機鹽、6%蔗糖暗處理15-30天,誘導溫度為200C,枝條切除頂芽,橫放或斜插于培養(yǎng)基中等因素,均有

6、利于塊莖的形成和膨大。在組培苗的扦插生根的試驗中,插枝用NAA1.0mg/ml+IBA1.0mg/ml浸泡處理,其生根效果最好,生根較快,根系發(fā)育良好,植株成活率高。組培苗前期長勢不及傳統(tǒng)苗,開花時間延遲, 但中后期植株的長勢比傳統(tǒng)苗旺盛,生長期也比傳統(tǒng)苗長。組培苗的塊莖主要在10-12月份膨大,其一年生塊莖粗短,而傳統(tǒng)苗一年生塊莖細長。組培苗的產量高,當年開花株率達68.7%,單株最高結果282個,平均單株結果數(shù)為102.3個,且大中