槐杞黃顆粒調(diào)控阿霉素腎病模型大鼠BcL-2-Bax信號通路改善足細胞損傷的機制.pdf

1、[背景/目的]本文主要分為3個部分。首先，我們對槐杞黃顆粒治療慢性腎臟病(ChronicKidney disease，CKD)進行了研究概述?；辫近S顆粒屬于中藥復(fù)方制劑，具有“祛風活血、滋陰益氣”的作用，是針對氣陰兩虛兼有外邪證型所制定的中成藥。在腎臟疾病領(lǐng)域，國內(nèi)外關(guān)于槐杞黃顆粒的臨床藥效學(xué)研究主要針對慢性腎小球腎炎、腎病綜合征、糖尿病腎病、IgA腎病等常見的原發(fā)性與繼發(fā)性CKD?；辫近S顆粒主要臨床功效在于改善相應(yīng)疾病的臨床癥狀，特別

2、在減少蛋白尿方面，具有顯著的效果?；辫近S顆粒治療CKD的藥理作用主要包括了抗炎、抗過敏、保護足細胞、活血改善循環(huán)以及增強免疫力等。其次，我們總結(jié)了腎臟細胞凋亡信號通路Bcl-2/Bax的調(diào)節(jié)機制與中藥干預(yù)效果。腎臟病的形成過程是由于各種致病因素影響，致使腎臟固有細胞損傷或損害，而出現(xiàn)的腎臟固有細胞凋亡、壞死，從而造成腎臟的功能減退或喪失，最終引發(fā)一系列臨床綜合征的出現(xiàn)。近年來，隨著實驗研究的不斷深入，認為多種病理類型腎病的發(fā)生發(fā)展及損傷

3、后的修復(fù)過程均伴隨著細胞凋亡參與。目前研究發(fā)現(xiàn)，一些中藥單體、中藥提取物或中藥復(fù)方等，均有調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax信號通路的作用，起到抑制腎臟細胞凋亡，達到減輕腎臟組織損傷的作用。最后，作為本研究的重點，我們報道了槐杞黃顆粒調(diào)節(jié)阿霉素腎病(Adriamyein inducednephropathy，ADRN)模型大鼠Bcl-2/Bax信號通路而改善足細胞的機制。我們通過借助單側(cè)腎臟切除并分2次頸靜脈注射阿霉素(Adriamycin，ADR

4、)的辦法，建立了ADRN模型。觀察槐杞黃顆粒對腎臟組織凋亡信號通路Bcl-2/Bax的干預(yù)作用，以及足細胞的改變，試圖在體內(nèi)闡述槐杞黃顆粒通過調(diào)控Bcl-2/Bax凋亡信號通路，改善腎臟細胞凋亡以及足細胞損傷的作用與機制。
　　[方法]采用單側(cè)腎臟切除并分2次頸靜脈注射ADR的辦法建立阿霉素腎病模型大鼠。26只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組（5只）、模型組（7只）、槐杞黃高劑量組（7只）、槐杞黃低劑量組（7只）。假手術(shù)組僅在手術(shù)時暴露右

5、側(cè)腎臟，隨即縫合。造模成功后，假手術(shù)組、模型組大鼠不給予任何藥物干預(yù)，每日給予2ml蒸餾水灌胃。槐杞黃高劑量組、槐杞黃低劑量組大鼠在造模成功后分別進行槐杞黃顆粒灌胃，其中低劑量組槐杞黃劑量為2g/kg，高劑量組槐杞黃劑量為4g/kg，均溶于2ml蒸餾水中。灌胃每日一次，共持續(xù)5周。各組大鼠于給藥開始計時，于第5周末處死。分別采集血液樣本以及腎臟組織，觀察24h尿蛋白排泄、生化指標，光鏡下觀察腎小球形態(tài)特征以及腎臟細胞凋亡，電鏡下觀察足細

6、胞形態(tài)特征以及Westen blotting檢測Bcl-2/Bax信號通路關(guān)鍵蛋白的表達。
　　[結(jié)果]槐杞黃顆粒能夠改善ADRN大鼠一般情況，改善24h尿蛋白的排泄與Scr、BUN、TP、Alb等血清生化指標，降低腎臟細胞凋亡，減輕足細胞損傷。此外，槐杞黃顆粒能夠上調(diào)腎臟組織Bcl-2蛋白的表達，下調(diào)Bax、Cytc、Caspase3蛋白的表達，從而起到抑制腎臟細胞凋亡的作用。
　　[結(jié)論]借助ADRN大鼠，我們可以闡明: