養(yǎng)殖刺參腐皮綜合癥病灶處七株優(yōu)勢菌生理生化特性及其群體感應(yīng)信號(hào)分子活性檢測.pdf

1、隨著國內(nèi)刺參養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，養(yǎng)殖過程中相繼出現(xiàn)了一系列病害問題，給刺參養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的損失。腐皮綜合癥因其傳染性高，死亡率高而成為刺參養(yǎng)殖病害的研究重點(diǎn)。該病發(fā)病特征為：染病初期，先從口部出現(xiàn)感染癥狀，表現(xiàn)為圍口膜松弛，觸手對外界刺激反應(yīng)遲鈍，繼而大部分刺參會(huì)出現(xiàn)排臟現(xiàn)象。中期感染的刺參身體收縮、僵直，一般口腹部出現(xiàn)小面積潰瘍，形成藍(lán)白色小斑點(diǎn)，漸漸喪失攝食能力。感染末期，病灶變大，潰瘍處增多，最后導(dǎo)致刺參死亡，溶化成鼻涕狀膠體。

2、 關(guān)于刺參疾病的研究目前國內(nèi)外均處于初級階段，一是因?yàn)榇虆⒉『κ墙鼛啄瓴懦霈F(xiàn)的；二是因?yàn)椴『Πl(fā)生情況隨機(jī)，沒有規(guī)律可循；三是發(fā)病原因和過程多種多樣，有種質(zhì)抗病力差、機(jī)械損傷、養(yǎng)殖環(huán)境不良等內(nèi)外因素，使問題更加復(fù)雜化。 為研究患病刺參腐皮綜合癥的發(fā)病機(jī)理及病灶處優(yōu)勢菌的性質(zhì)和群體感應(yīng)系統(tǒng)，本文以青島某養(yǎng)殖場的養(yǎng)殖刺參為材料，對從患病刺參病灶部位分離純化得到的七株優(yōu)勢菌，即：C6、4、TB、BP2、BP3、BP4、BP6，進(jìn)行

3、理化性質(zhì)研究，結(jié)果表明，這七株菌生長較為迅速，TB、BP2和BP3在培養(yǎng)13小時(shí)左右便進(jìn)入平臺(tái)期：4、BP4和BP6培養(yǎng)19小時(shí)左右生長進(jìn)入平臺(tái)期；C6生長最慢，需要培養(yǎng)22小時(shí)后生長進(jìn)入平臺(tái)期。最佳培養(yǎng)條件為：鹽度33～36‰，溫度32℃左右，pH值7～8左右?？股孛舾袑?shí)驗(yàn)及生化指標(biāo)測定的結(jié)果表明，這七株菌對氟嗪酸、氯霉素、先鋒必、復(fù)方新諾明、紅霉素、慶大霉素、氟哌酸等抗生素有廣泛的抗性；在測試的20項(xiàng)生化指標(biāo)中精氨酸雙水解酶、賴氨

4、酸脫羧酶、鳥氨酶脫羧酶、脲酶、色氨酸脫氨酶、3-羥基丁酮酶均為陽性反應(yīng)。 通過對七株優(yōu)勢菌進(jìn)行群體感應(yīng)信號(hào)分子的提取、純化、鑒定等方面的研究發(fā)現(xiàn)，菌株C6、4、TB、BP2、BP3、BP4和BP6的群體感應(yīng)信號(hào)分子確實(shí)存在，但是其產(chǎn)生量很少，與陽性對照有鮮明的對比。AHLs是由一個(gè)可變的乙?；溛膊颗c一個(gè)穩(wěn)定的高絲氨酸內(nèi)酯頭部相連，該結(jié)構(gòu)在酸性條件下最穩(wěn)定，強(qiáng)堿可能導(dǎo)致高絲氨酸內(nèi)酯開環(huán)，從而破壞其結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)表明，七株優(yōu)勢菌株群體

5、感應(yīng)信號(hào)分子的活性與培養(yǎng)基pH值的變化基本上成反比，由此推測，在偏堿性的液體中，很可能會(huì)造成信號(hào)分子的分解而降低其活性。根據(jù)相關(guān)資料顯示，刺參養(yǎng)殖池中移植大葉藻能夠大幅減少腐皮綜合癥的發(fā)病幾率。由此推測，大葉藻中很可能含有能夠拮抗AHLs的活性物質(zhì)，如果能將這種活性物質(zhì)提取出來，將對防治刺參腐皮綜合癥有積極的意義。本研究為進(jìn)一步探索養(yǎng)殖刺參腐皮綜合癥的發(fā)病原因、過程和新型抗菌手段以及其它致病菌的抗感染研究提供重要的參考，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的抗