地塞米松抑制LPS和TNF-α誘導(dǎo)的人氣道平滑肌細(xì)胞IL-33表達(dá).pdf

1、目的:
　　白介素33(IL-33)是最新發(fā)現(xiàn)的IL-1家族成員,是一個組織來源的細(xì)胞因子,主要位于核內(nèi)。其受體為ST2,兩者結(jié)合可以介導(dǎo)Th2免疫反應(yīng),而Th2/Th1反應(yīng)失衡在支氣管哮喘的發(fā)病中起重要作用。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革蘭陰性桿菌的胞壁成分,能介導(dǎo)支氣管哮喘炎癥反應(yīng)。LPS通過結(jié)合Toll樣受體4(TLR-4)參與免疫反應(yīng)。近年的研究發(fā)現(xiàn)氣道平滑肌細(xì)胞(ASMC)同樣能夠參與炎癥反應(yīng)

2、,且細(xì)胞表面可以表達(dá)TLR-4。這篇研究旨在對LPS能否刺激離體培養(yǎng)的人ASMC產(chǎn)生IL-33,作為難治性哮喘可能相關(guān)因子之一——TNF-α是否與LPS具有協(xié)同刺激作用以及糖皮質(zhì)激素對IL-33生成的影響展開討論。
　　方法:
　　手術(shù)室收取因肺部疾病行肺段或肺葉切除的人支氣管標(biāo)本(直徑0.5-1.0cm),原代培養(yǎng)支氣管平滑肌細(xì)胞,選取6-8代平滑肌細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗。以每孔105cells/cm2種于六孔板中,分別或聯(lián)合加入各

3、刺激物L(fēng)PS、TNF-α、哮喘致敏血清(AAS)、IgE。抑制實(shí)驗則將DXM、SB203580、PD98059等抑制物提前各刺激物30分鐘加入。相應(yīng)時間點(diǎn)收集細(xì)胞上清行ELISA,收集細(xì)胞提取RNA行實(shí)時熒光定量PCR檢測。
　　結(jié)果:
　　LPS引起人氣道平滑肌細(xì)胞IL-33基因表達(dá)增高(p<0.05);哮喘致敏血清可能促進(jìn)氣道平滑肌細(xì)胞IL-33產(chǎn)生,但這種效應(yīng)與IgE作用關(guān)系不大(p>0.05);DXM抑制經(jīng)LPS和T

4、NF-α誘導(dǎo)的IL-33mRNA生成(p<0.05);SB203580和PD98059部分抑制LPS和TNF-α誘導(dǎo)的IL-33生成。IL-33在細(xì)胞上清中的水平實(shí)驗組與對照組基本一致。
　　結(jié)論:
　　糖皮質(zhì)激素能抑制多種細(xì)胞因子的生成而發(fā)揮抗炎作用。本實(shí)驗證明地塞米松能夠在體外抑制LPS和TNF-α誘導(dǎo)的IL-33基因表達(dá),而p38MAPK和ERK通路抑制劑不能完全阻斷這種作用。目前糖皮質(zhì)激素在哮喘控制和治療中仍然有重要