“腸病治肺”對相關(guān)信號通路及肺腸微生態(tài)的影響.pdf

1、目的：通過復(fù)制SD大鼠“潰瘍性結(jié)腸炎”模型，同步觀察治療組、模型組和空白組大鼠在不同時間點肺腸組織中的轉(zhuǎn)化生長因子以及表皮生長因子的表達(dá)水平，同時找尋肺腸微生態(tài)菌群變化規(guī)律，探討“腸病及肺”病理傳變機制及物質(zhì)基礎(chǔ)，從而為“腸病治肺”法提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　方法：將100只健康SD大鼠按體重隨機分為空白組和模型組、治療組，除模型組為40只外，其余兩組各30只。模型組大鼠與治療組大鼠選用TNBS(三硝基苯磺酸）誘導(dǎo)灌腸法,構(gòu)建“潰

2、瘍性結(jié)腸炎”模型，空白組大鼠予等量生理鹽水灌腸。首次造模后每7天重復(fù)造模直至實驗結(jié)束。治療組大鼠于造模后第8天后開始灌胃治療，選用三拗湯，空白組和模型組大鼠按上述方法給予等量生理鹽水灌腸，每天1次。分別于首次造模后第8、29、50天處死大鼠取其結(jié)腸、肺組織行HE染色觀察病理形態(tài)改變，電鏡觀察組織超微結(jié)構(gòu)改變，免疫組化法檢測結(jié)腸、肺組織EGF/ErbB3和TGFβ/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)，收集支氣管肺泡灌洗液及糞便，檢測菌

3、群結(jié)果。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化：
　　第8天，模型組較空白組大鼠結(jié)腸組織EGF/ErbB3信號蛋白表達(dá)降低，TGFβ/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)明顯升高，肺組織中EGF/ErbB3信號和TGFβ/TGFβR/Smads信號蛋白表達(dá)變化不明顯，造模第29、50天，結(jié)腸組織EGF/ErbB3信號蛋白表達(dá)逐漸升高，TGFβ/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)逐漸降低，肺組織EGF/ErbB3信號和TG

4、Fβ/TGFβR/Smads信號蛋白表達(dá)均發(fā)生明顯改變。第29天，治療組較模型組大鼠 EGF/ErbB3信號蛋白表達(dá)明顯升高，TGFβ/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)明顯降低，肺組織EGF/TGFβ信號蛋白表達(dá)明顯升高，ErbB3/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)變化不明顯；第50天，治療組較模型組大鼠EGF/ErbB3和TGFβ/TGFβR/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)變化不明顯；肺組織TGFβR信號蛋白表達(dá)明顯降低，EG

5、F/ErbB3和TGF/Smads信號相關(guān)蛋白表達(dá)變化不明顯。
　　2.菌群
　　模型第8天時，需氧總數(shù)和葡萄球菌在呼吸道和腸道同步增多，厭氧總數(shù)和腸桿菌在腸道增多而在呼吸道減少。模型第29天時，需氧總數(shù)和葡萄球菌在在呼吸道和腸道同步減少，厭氧總數(shù)和腸桿菌在腸道減少而在呼吸道增多；模型第50天時，呼吸道和腸道的需氧總數(shù)、厭氧總數(shù)和葡萄球菌在呼吸道和腸道同步增多。治療第29、50天時，腸道和呼吸道腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌同步增多，

6、同一時間點治療組較模型組各菌種總數(shù)變化顯著，治療組第50天各菌種檢測結(jié)果與空白組無明顯差異性。
　　結(jié)論：
　　1.“潰瘍性結(jié)腸炎”大鼠模型可以出現(xiàn)肺部損傷，肺部損傷發(fā)生時間滯后于結(jié)腸病變時間，其損傷程度隨結(jié)腸病變進(jìn)展而加重,腸病可以影響到肺，其傳變是一個漸進(jìn)演變的過程。
　　2.肺與結(jié)腸組織EGF/ErbB3表達(dá)的相關(guān)性與特異性：實驗研究發(fā)現(xiàn)，潰瘍性結(jié)腸炎模型中大鼠的肺與腸的EGF/ErbB3與TGFβ/TGFβR/

7、Smads信號相關(guān)蛋白變化，可能通過對結(jié)腸和肺的損傷修復(fù)作用介導(dǎo)“腸病及肺”的病理傳變過程，可能是“腸病及肺”病理傳變的共同基本物質(zhì)基礎(chǔ)之一，肺與大腸在病理情況下是通過EGF/ErbB3和TGFβ/TGFβR/Smads的相關(guān)調(diào)控實現(xiàn)的，為進(jìn)一步證明“肺與大腸相表里”提供可能。
　　3.“潰瘍性結(jié)腸炎”治療組較模型大鼠肺損傷過程中信號相關(guān)蛋白變化更明顯，藥物干預(yù)可能對肺組織損傷的修復(fù)過程有一定的促進(jìn)作用，同時也說明結(jié)腸組織較肺組織

8、損傷出現(xiàn)較早，修復(fù)過程持續(xù)時間短，本次實驗表現(xiàn)較突出，而肺組織完全修復(fù)時間需要的時間更長。
　　4.從微生態(tài)菌群變化角度說明：當(dāng)出現(xiàn)潰瘍性結(jié)腸炎時，部分肺腸菌群可出現(xiàn)同步規(guī)律性變化，或同步增多，或同步減少。說明腸部的病變可以及肺部的病變，菌群的變化可能是“腸病及肺”的途徑和表現(xiàn)形式之一，藥物干預(yù)可能對腸道和呼吸道菌群調(diào)整過程有正向促進(jìn)作用，為“肺與大腸相表里”提供部分微生態(tài)學(xué)實驗依據(jù)。
　　5.通過藥物的干預(yù)機制，引起肺腸相