乳源CGMP對IBD相關信號通路途徑影響的研究.pdf

1、酪蛋白糖巨肽(Casein Glycomacropeptide，CGMP)是一種來源于牛乳κ-酪蛋白的生物活性肽，不含芳香族氨基酸，可作為苯丙酮酸尿癥(PKU)患者的食品。CGMP諸多的生物活性已得到證實，如具有良好的營養(yǎng)特性、提高智力發(fā)育、促益生菌增殖以及免疫調(diào)節(jié)等。炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Diseases，IBD)主要包括潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis，uc)和克羅恩病(Crohn's

2、Disease，CD)，是一組病因未明的慢性腸道炎癥性疾病，目前大多學者認為腸壁粘膜免疫調(diào)節(jié)異常、腸壁粘膜屏障缺損、遺傳和環(huán)境等因素共同參與了疾病的發(fā)生發(fā)展進程。臨床上對IBD患者的藥物治療包括5-氨基水楊酸、糖皮質激素和免疫抑制劑，但療效并不令人滿意，且毒副作用較大，因此開發(fā)一種有效的營養(yǎng)治療方案成為了該領域的研究熱點。研究發(fā)現(xiàn)乳源CGMP可能參與腸粘膜免疫應答，調(diào)節(jié)免疫細胞亞群的平衡，有可能成為緩解和治療IBD的一條新途徑，因此更深

3、入的研究CGMP治療IBD的分子機理具有重大的實踐意義。
　　 本研究利用惡唑酮誘導建立潰瘍性結腸炎(UC)小鼠模型，以CGMP組1(50mg/(kg bw·d))、CGMP組2(500 mg/(kg bw·d))和SASP藥物治療組(40 mg/(kg bw·d))的劑量連續(xù)灌胃4天;首先用HE染色觀察和評價小鼠結腸大體形態(tài)損傷和病理組織學變化，然后利用免疫組織化學技術(IHC)檢測各組小鼠經(jīng)CGMP干預后腸道粘膜因子CD4、

4、CD8、MAdCAM-1、sIgA的表達情況，最后利用Western Blotting技術檢測CGMP對潰瘍性結腸炎小鼠腸粘膜免疫信號通路蛋白MEKK1、Smad3、Smad7表達的影響，以探討并闡述CGMP在改善和修復UC病癥的炎性狀態(tài)的分子機制。結果表明:CGMP組1(50 mg/(kg bw·d))、CGMP組2(500 mg/(kg bw·d))均可在一定程度上改善惡唑酮誘導的小鼠結腸炎中結腸大體形態(tài)損傷，尤其CGMP組1(50

5、 mg/(kg bw·d))的作用較為明顯，與藥物治療組相比不存在顯著性差異;CGMP也可顯著降低結腸粘膜固有層中MAdCAM-1、CD4、CD8的表達，促進sIgA的表達。同時有效通過抑制MEKK1和Smad7蛋白的表達，直接參與抑制MAPK的激活、激活TGF-β1/Smads信號通路途徑，間接抑制IKK作用于IκdB的磷酸化、激活IκBα的活性，共同抑制NF-κB的激活，維持腸粘膜免疫調(diào)節(jié)的平衡和保護腸粘膜免疫屏障功能，從而減緩炎癥