食管鱗癌5-脂氧合酶mRNA、環(huán)氧合酶-2mRNA和VEGF的表達(dá)及血管生成的關(guān)系.pdf

1、背景與目的食管癌是嚴(yán)重威脅我國人們生命健康的惡性腫瘤之一，我國每年死于食管癌人數(shù)約15萬，為世界之最，其中以食管鱗狀上皮細(xì)胞癌(ESCC)為主，約占90％以上。食管癌具有高度侵襲與轉(zhuǎn)移潛能，是造成其較高死亡率的重要原因。因此，深入了解ESCC浸潤、轉(zhuǎn)移的機制，尋求更新、更好的治療靶點有重要意義。 流行病學(xué)調(diào)查分析表明：長期、規(guī)律服用阿司匹林或其他非甾體類抗炎藥(NSAIDs)能夠降低多種消化道腫瘤的發(fā)病率，其可能是通過抑制參與花

2、生四烯酸代謝的環(huán)氧合酶途徑而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。但越來越多的研究表明，除環(huán)氧合酶途徑外，花生四烯酸的代謝另外的主要代謝途徑-脂氧合酶代謝途徑，在腫瘤的進展過程中也具有重要的作用。 5-脂氧合酶(5-LOX)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)分別是花生四烯酸脂氧合酶、環(huán)氧合酶兩條代謝途徑中重要的限速酶，近年研究發(fā)現(xiàn)在ESCC組織中存在5-LOX和COX-2的高表達(dá)，我們以往的研究證實COX-2與ESCC的浸潤與轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但尚不清楚5-L

3、OX在ESCC中作用和生物學(xué)意義，及兩者之間的關(guān)系。 血管生成是腫瘤得以迅速生長的關(guān)鍵，是腫瘤組織發(fā)生浸潤轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)被認(rèn)為是腫瘤組織中促血管生成的最主要的血管生長因子,VEGF通過結(jié)合其相應(yīng)的受體來介導(dǎo)血管生成的信號。研究發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞中花生四烯酸的代謝產(chǎn)物的表達(dá)與VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)。但在食管鱗癌組織中，花生四烯酸脂氧合酶、環(huán)氧合酶兩條代謝途徑與VEGF的具體關(guān)系尚不清楚。

4、 微血管密度(MVD)計數(shù)，是常用的研究血管生成的組織學(xué)定量方法，并可能作為多種實體瘤的獨立預(yù)后因子。CD105(Endoglin)是內(nèi)皮細(xì)胞表面與增殖相關(guān)的膜抗原，主要表達(dá)于腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞，與腫瘤血管生成和腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。與常用的泛內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物相比(如CD31，CD34和Ⅷ-RA)，CD105更具特異性。 本研究旨在分析ESCC組織中5-LOXmRNA、COX-2mRNA和VEGF蛋白的表達(dá)，及5-LOX、C

5、OX-2與ESCC主要臨床病理特征的關(guān)系，并試探討5-LOXmRNA和COX-2mRNA與腫瘤血管生成的相關(guān)性及可能機制。 方法選取自2005年5～8月安陽市腫瘤醫(yī)院胸外科手術(shù)切除的食管鱗癌組織(T)和相應(yīng)癌旁正常組織(N)新鮮標(biāo)本35例，均經(jīng)手術(shù)和病理證實為ESCC。用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測每例食管鱗癌組織(T)和相應(yīng)癌旁正常組織(N)的5-LOXmRNA和COX-2mRNA的表達(dá)，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(

6、GAPDH)mRNA做內(nèi)參照求得各自的T/N值；采用S-P免疫組織化學(xué)法檢測VEGF的表達(dá)情況，結(jié)果用病理分析系統(tǒng)進行形態(tài)學(xué)定量求得VEGF的相對含量，計算T/N值，同時檢測CD105的表達(dá)情況，計數(shù)微血管密度，求得T/N值。5-LOXmRNA、COX-2mRNA、VEGF和MVD的T/N值與食管鱗癌各臨床病理因素，兩均數(shù)比較采用成組t檢驗；兩變量間相關(guān)分析采用直線相關(guān)分析，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。 結(jié)果1、在35例ESCC患

7、者中，33例5-LOXmRNA的T/N值＞1.0，占94.3％，范圍在0.68～11.08之間，平均值為4.22±2.68，癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織，5-LOXmRNA的T/N值在腫瘤直徑≥3cm組明顯高于直徑＜3cm組(4.88±7.26vs.2.99±2.09，P=0.045)，低分化組明顯高于高中分化組(4.94±2.41vs.3.01±2.76，P=0.037)，外膜浸潤組明顯高于無外膜浸潤組(5.06±2.59vs.

8、1.81±0.90,P=0.001)，淋巴轉(zhuǎn)移組顯著高于無淋巴轉(zhuǎn)移組(5.16±2.80vs.2.82±1.78,P=0.009)。2、在35例ESCC患者中，33例患者COX-2mRNA的T/N值＞1.0，占94.3％，范圍在0.73～10.66之間，平均值為3.92±2.64，癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織，COX-2mRNA的T/N值在腫瘤直徑≥3cm組明顯高于直徑＜3cm組(4.69±2.75vs.2.47±1.72，P=0

9、.016)，低分化組明顯高于高、中分化組(4.66±2.54vs.2.69±2.45，P=0.032)，外膜浸潤組明顯高于(4.75±2.59vs.1.56±0.60，P=0.001)，淋巴轉(zhuǎn)移組的明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移組(4.85±2.75vs.2.55±1.80，P=0.010)。3、在35例ESCC患者中，34例患者MVD的T/N值＞1.0，占97.1％，，范圍在0.95～7.37之間，平均值為3.56±1.88，癌組織中的表達(dá)明顯高

10、于癌旁正常組織，MVD的T/N值在腫瘤直徑≥3cm組明顯高于直徑＜3cm組(4.14±1.80vs.2.44±1.54，P=0.009)，低分化組明顯高于高中分化組(4.18±1.90vs.2.50±1.33，P=0.004)，外膜浸潤組明顯高于無外膜浸潤組明顯高于無外膜浸潤組(4.15±1.80vs.1.82±0.62，P=0.001)，淋巴轉(zhuǎn)移組明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移組(4.14±1.72vs.2.67±1.81，P=0.021)。4、

11、在35例ESCC患者中，30例VEGF蛋白相對含量的T/N值＞1.0，占85.7％，范圍在0.44～8.32之間，平均值為3.90±2.47，癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織，VEGF蛋白相對含量的T/N值在腫瘤直徑≥3cm組與直徑＜3cm組(4.35±2.52vs.3.06±2.22，P=0.137)無顯著差異，在低分化組與高、中分化組(4.50±2.46vs.2.86±2.23，P=0.060)無顯著差異，外膜浸潤組明顯高于無外膜

12、浸潤組明顯高于無外膜浸潤組(4.43±2.45vs.2.83±1.94，P=0.030)，淋巴轉(zhuǎn)移組明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移組(5.43±1.69vs.1.44±0.82，P=0.001)。5、5-LOXmRNA的T/N值與COX-2mRNA的T/N值呈正相關(guān)(r=0.945,P＜0.01)；與MVD的T/N值呈正相關(guān)(r=0.822，P＜0.01)；與VEGF相對含量的T/N值正相關(guān)(r=0.539，P＜0.01)。6、COX-2mRNA的

13、T/N值與MVD的T/N值呈正相關(guān)(r=0.866，P＜0.01)；與VEGF相對含量的T/N值正相關(guān)(r=0.481，P＜0.01)。7、VEGF相對含量的T/N值與MVD的T/N值正相關(guān)(r=0.415，P＜0.05)。 結(jié)論1、ESCC組織中5-LOXmRNA與COX-2mRNA表達(dá)共同升高，與ESCC的浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。2、VEGF蛋白在ESCC組織中表達(dá)升高，與ESCC的浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。3、以CD105標(biāo)染的MVD與ES