湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的發(fā)育性變化研究.pdf

1、本文以0～6月齡的雄性湖羊羔羊?yàn)樵囼?yàn)對(duì)象，探討了湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪沉積的發(fā)育性變化以及脂肪沉積和代謝相關(guān)基因表達(dá)的發(fā)育性變化特點(diǎn)。本研究用索氏抽提法測(cè)定肌內(nèi)脂肪含量；以GAPDH基因?yàn)閮?nèi)標(biāo)，用real time PCR法對(duì)影響肌內(nèi)脂肪含量的部分相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行了相對(duì)定量分析；并對(duì)基因表達(dá)與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性進(jìn)行了分析。 1．湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪沉積的發(fā)育性變化 (1)湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪含量

2、在0～6月齡間均呈上升趨勢(shì)，5月齡時(shí)極顯著高于前面各月齡(P<0.01)；在背最長(zhǎng)肌中，2月齡時(shí)IMF顯著高于初生時(shí)(P<0.05)；腰大肌IMF在3月齡時(shí)顯著高于初生時(shí)(P<0.05)；后腿股二頭肌IMF在前4個(gè)月齡時(shí)差異均不顯著；在0～6月齡間，背最長(zhǎng)肌IMF含量均高于腰大肌和股二頭??；表明肌內(nèi)脂肪沉積在綿羊不同部位肌肉沉積的速度有較明顯差異，湖羊肌內(nèi)脂肪的沉積有較明顯的組織特異性。 (2)4～5月齡是湖羊羔羊肌肉脂肪沉積最

3、快的時(shí)期，5月齡時(shí)的肌內(nèi)脂肪含量在不同肌肉部位都極顯著高于前面各月齡(P<0.01)，表明4～5月齡時(shí)是湖羊羔羊肌內(nèi)脂肪迅速沉積的一個(gè)重要時(shí)期。 2．湖羊羔羊肌肉OB基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)在湖羊羔羊背最長(zhǎng)肌中，OB基因mRNA表達(dá)水平3月齡時(shí)極顯著高于其余各月齡(P<0.01)；在腰大肌中，初生時(shí)表達(dá)水平最高，顯著高于2～3月齡(P<0.05)，3月齡時(shí)下降到最低，到4月齡后回升；在前腿肌肉中，初

4、生羔羊的OB基因表達(dá)量最高，顯著高于3、5和6月齡(P<0.05)，然后隨月齡增加而波動(dòng)下降，6月齡時(shí)降到最低；后腿肌肉中，初生時(shí)OB基因表達(dá)量較低，隨月齡的增加而上升，3月齡時(shí)升到最高，極顯著高于初生時(shí)(P<0.01)，顯著高于其余各月齡(P<0.05)，然后4月齡時(shí)回落，并保持這種低水平表達(dá)； (2)初生時(shí)腰大肌和前腿肌肉OB基因表達(dá)水平極顯著高于背最長(zhǎng)肌和后腿肌肉(P<0.01)，3月齡時(shí)背最長(zhǎng)肌極顯著高于腰大肌和前腿肌肉

5、(P<0.01)，后腿肌肉顯著高于腰大肌和前腿肌肉(P<0.05)；表明OB基因mRNA表達(dá)水平發(fā)育性變化在湖羊羔羊肌肉中表現(xiàn)出較明顯的組織特異性； (3)背最長(zhǎng)肌中OB基因的表達(dá)與IMF在3～6月齡間成負(fù)相關(guān)(r=-0.405，P=0.119)，股二頭肌OB基因的表達(dá)量與IMF在3～6月齡間成負(fù)相關(guān)(r=-0.303，P=0.194)，表明OB基因在肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪的沉積起著一定的負(fù)作用。 3．湖羊羔羊肌肉OB

6、R基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)OBR基因mRNA在湖羊羔羊不同部位肌肉中的發(fā)育變化模式基本相同，即在剛出生時(shí)表達(dá)量均較低，然后隨月齡增加而上升，到3月齡時(shí)各部位均升到最高，然后又下降，保持一個(gè)相對(duì)較低的水平；腰大肌中，2月齡時(shí)OBR mRNA的表達(dá)水平極顯著高于0～1月齡和4～6月齡(P<0.01)；背最長(zhǎng)肌中OBR表達(dá)水平在3月顯著高于2和6月齡(P<0.05)；OBR基因在肱二頭肌中的表達(dá)水平在3月齡時(shí)極

7、顯著大于其余各月齡(P<0.01)；在股二頭肌中，3月齡時(shí)OBR基因表達(dá)水平極顯著大于0～1和5～6月齡(P<0.01)，顯著高于4月齡(P<0.05)，6月齡水平顯著低于2月齡(P<0.05)； (2)2月齡時(shí)股二頭肌OBR基因mRNA表達(dá)量極顯著高于背最長(zhǎng)肌(P<0.01)，3月齡時(shí)肱二頭肌和股二頭肌均高于腰大肌和背最長(zhǎng)肌(P<0.05)，4月齡時(shí)股二頭肌極顯著高于腰大肌(P<0.01)，表明OBR基因在湖羊羔羊肌肉中的表

8、達(dá)呈現(xiàn)出組織特異性和時(shí)序性發(fā)育變化模式； (3)股二頭肌中OBR基因的表達(dá)量與IMF在本研究中的各月齡均呈明顯的負(fù)相關(guān)(r=-0.433，P=0.012)；在背最長(zhǎng)肌(r=-0.128，P=0.209)和腰大肌中(r=-0.254，P=0.168)也發(fā)現(xiàn)成負(fù)相關(guān)，表明OBR基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪的沉積也起一定的負(fù)作用。 4．湖羊羔羊下丘腦OBR基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)湖羊羔羊下丘

9、腦OBR基因在0～6月齡間保持穩(wěn)定表達(dá)水平； (2)湖羊下丘腦OBR基因表達(dá)水平與各部位肌肉肌內(nèi)脂肪含量無明顯相關(guān)性。 5．湖羊羔羊肌肉FAS基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)湖羊羔羊背最長(zhǎng)肌中FAS基因mRNA表達(dá)在初生時(shí)較低，然后波動(dòng)上升，到5月齡時(shí)升到最高(P<0.01)； (2)除4月齡時(shí)，腰大肌FAS基因mRNA水平均極顯著高于其余各部位肌肉(P<0.01)；2月齡和5～6月齡時(shí)背最

10、長(zhǎng)肌FAS表達(dá)也極顯著高于其余各部位(P<0.01)；3月齡時(shí)前腿肌肉FAS mRNA水平極顯著高于其它部位肌肉(P<0.01)。表明FAS基因表達(dá)在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化有明顯的組織特異性； (3)背最長(zhǎng)肌FAS基因表達(dá)量與IMF在0～6月齡呈極顯著正相關(guān)(r=0.606，P=0.005)，腰大肌中FAS基因表達(dá)量與IMF在4～6月齡呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.360 P=0.187)，股二頭肌中FAS基因表達(dá)量與IMF在4～6

11、月齡呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.471，P=0.076)，表明FAS基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪的沉積可能起著正向調(diào)控的作用。 6．湖羊羔羊肌肉HSL基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)HSL基因在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化表現(xiàn)為：背最長(zhǎng)肌中初生時(shí)最低，隨月齡的增加上升，3月齡時(shí)出現(xiàn)峰值，顯著高于0～1月齡(P<0.05)，然后又下降，6月齡時(shí)升到最高，極顯著高于以前各月齡(P<0.01)；腰大肌中表現(xiàn)為“下降-

12、上升-下降-上升”的模式，3月齡時(shí)最高，極顯著高于1和4月齡(P<0.01)； (2)在0～6月齡，腰大肌中HSL，基因mRNA表達(dá)量均極顯著高于其它部位(P<0.01)，0月齡時(shí)背最長(zhǎng)肌極顯著低于其它部位(P<0.01)，4月齡時(shí)股二頭肌極顯著低于其余部位(P<0.01)，6月齡時(shí)背最長(zhǎng)肌極顯著高于前腿和后腿肌肉(P<0.01)；表明HSL基因表達(dá)在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化有明顯的組織特異性，其中在腰大肌中的表達(dá)量顯著高于其

13、余各肌肉部位； (3)對(duì)湖羊羔羊不同部位肌肉中HSL基因的表達(dá)量和IMF的相關(guān)性分析表明：各部位肌肉中兩者均呈正相關(guān)關(guān)系，其中背最長(zhǎng)肌在0～6月齡呈極顯著相關(guān)(r=0.630，P=0.0003)，腰大肌和股二頭肌中4～6月齡兩者的相關(guān)系數(shù)分別為0.589(P=0.020)和0.280(P=0.121)，表明HSL基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪沉積的調(diào)控可能不是在mRNA水平，可能在蛋白水平上。 7．湖羊羔羊肌LPL基因

14、表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)LPL基因在湖羊羔羊不同肌肉部位表現(xiàn)出較明顯的差異：在背最長(zhǎng)肌中LPL基因的表達(dá)隨月齡的增加而上升，到5月齡時(shí)升到最高，顯著高于1～4月齡(P<0.05)，極顯著高于0月齡(P<0.01)；在腰大肌中LPL水平初生時(shí)較高，到1月齡時(shí)上升，到3月齡間穩(wěn)定，4月齡時(shí)下降到最低，5～6月齡回升到1～3月齡時(shí)的水平，各月齡間差異不顯著；前腿肌肉中，0～2月齡保持穩(wěn)定，3月齡時(shí)升到最高，4月時(shí)下降

15、，5月齡時(shí)上升，到6月又下降，其中3和5月齡時(shí)的表達(dá)量極顯著高于其余各月齡(P<0.01)； (2)在剛出生時(shí)，股二頭肌中LPL mRNA水平極顯著高于其余部位肌肉(P<0.01)，1～2月齡時(shí)腰大肌和股二頭基因表達(dá)量均高于另外兩個(gè)研究部位(P<0.05)，3月齡時(shí)股二頭肌極顯著高于背最長(zhǎng)肌(P<0.01)，4月齡時(shí)背最長(zhǎng)肌和股二頭肌均顯著高于另外兩個(gè)部位(P<0.05)，6月齡時(shí)肱二頭肌極顯著低于其余三個(gè)部位(P<0.01)；

16、 (3)湖羊羔羊背最長(zhǎng)肌中LPL基因的表達(dá)量與IMF在0～6月齡呈極顯著正相關(guān)(r=0.503，P=0.005)，在股二頭肌肌肉中，LPL基因mRNA水平與IMF呈正相關(guān)(r=0.294，P=0.102)，表明LPL基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪的沉積有一定的積極作用。 8．湖羊肌肉UCP3基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對(duì)IMF的影響 (1)湖羊羔羊不同部位肌肉中UCP3基因表達(dá)的發(fā)育性變化表現(xiàn)為：在背最長(zhǎng)肌中，初生

17、時(shí)較高，到1月齡時(shí)升到最高，然后隨月齡增加下降，6月齡時(shí)降到最低，各月齡間差異不顯著；腰大肌中表現(xiàn)為先上升后下降的模式，3月齡時(shí)出現(xiàn)峰值，各月齡間差異不顯著；前腿肌肉中初生時(shí)較高，1月齡有所下降，2月齡升到最高值，3月齡下降到最低，4月齡回升后又逐漸下降，各月齡間差異不顯著；后腿肌肉在各月齡間保持較穩(wěn)定的水平，沒有較大差異； (2)在3月齡時(shí)腰大肌中刪基因表達(dá)水平顯著高于其余三個(gè)肌肉部位；表明UCP3基因在湖羊不同部位肌肉中的發(fā)

18、育性變化有差異，但差異不明顯。 (3)湖羊羔羊背最長(zhǎng)肌中UCP3基因的表達(dá)量與背最長(zhǎng)肌IMF在0～6月齡呈負(fù)相關(guān)(r=-0.211，P=0.262)；在股二頭肌肌肉中，UCP3基因mRNA水平與股二頭肌中IMF在2～6月齡間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.209，P=0.328)；在腰大肌中，UCP3基因的表達(dá)量與IMF在3～6月齡成負(fù)相關(guān)(r=-0.286，P=0.266)，表明UCP3基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對(duì)肌內(nèi)脂肪的沉積可能起著負(fù)向調(diào)