豬PID1基因的克隆、表達及其與肌內(nèi)脂肪沉積關系的研究.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，豬肉品質(zhì)已引起了消費者和生產(chǎn)者的廣泛重視。遺傳基礎是改善肉品質(zhì)的關鍵。肌內(nèi)脂肪（IMF）的含量是衡量豬肉品質(zhì)的一個重要的指標，它對肉的嫩度、多汁性和風味有明顯的正效應，目前關于調(diào)控豬肌內(nèi)脂肪沉積的機理還不清楚，主效基因還沒有確定。本研究以遺傳背景有較大差異的萊蕪豬、培育品種魯萊黑豬、引入品種大白豬為研究對象，對豬磷酸酪氨酸互作結構域1（phosphotyrosine interactiondomain conta

2、ining1，PID1）基因進行了克隆表達分析，旨在為肉質(zhì)改良的MAS育種篩選有效的分子標記提供理論依據(jù)。研究結果如下：
　　 以萊蕪豬為研究對象，利用兼并引物進行RT-PCR從萊蕪豬脂肪和肌肉組織中克隆PID1基因CDS區(qū)全序列（已提交NCBI，登錄號：GU1396255），并對其進行生物信息學分析。結果表明：PID1基因CDS區(qū)全長654 bp，編碼含217個氨基酸的蛋白，其定位在細胞質(zhì)，分子量為54kDa，等電點為5.11

3、，蛋白功能預測發(fā)現(xiàn)，PID1的C端有-PTB（磷酸酪氨酸作用位點）結構域，與IRS1、SHC中PTB結構域的結構相似，提示可能有相似的功能，在糖和脂肪代謝中發(fā)揮重要作用。
　　 以萊蕪豬為研究對象，應用QRT-PCR技術研究PID1基因在萊蕪豬10個不同組織（心臟、背最長肌、脾臟、肝臟、肺臟、小腸、大腸、腦、脂肪、脊髓）的表達譜信息。結果表明：PID1基因在大多數(shù)組織中均有表達，其在各組織中的mRNA表達豐度表現(xiàn)為：心臟>腦>肝

4、臟>脂肪>背最長肌>肺臟>脊髓>大腸>脾臟，而在小腸中未見明顯表達，推測PID1基因在萊蕪豬的生長過程中起到廣泛的生物學作用，提示它調(diào)節(jié)目的基因轉(zhuǎn)錄具有廣泛性。
　　 運用QRT-PCR技術，研究PID1基因在萊蕪豬、魯萊黑豬、大白豬三個豬種的脂肪、背最長肌和肝臟組織中的mRNA表達差異及其與IMF相關性，結果表明：豬品種因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應（P<0.05），總體表現(xiàn)為：萊蕪豬>魯萊黑豬>大白豬。組織因

5、素對PID1mRNA表達量具有顯著影響效應（P<0.05），總體表現(xiàn)為：肝臟>脂肪>肌肉。品種與組織之間的互作對該基因表達量也具有顯著影響效應（P<0.05）；對于高IMF（LWH）、中等IMF（LWI）和低IMF（LWL）沉積的3組萊蕪豬，IMF沉積因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應（P<0.05），總體表現(xiàn)為：LWH>LWI>LWL。組織因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應（P<0.05），總體表現(xiàn)為：肝臟>脂