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文檔簡介
1、隨著人們生活水平的提高,豬肉品質(zhì)已引起了消費者和生產(chǎn)者的廣泛重視。遺傳基礎是改善肉品質(zhì)的關鍵。肌內(nèi)脂肪(IMF)的含量是衡量豬肉品質(zhì)的一個重要的指標,它對肉的嫩度、多汁性和風味有明顯的正效應,目前關于調(diào)控豬肌內(nèi)脂肪沉積的機理還不清楚,主效基因還沒有確定。本研究以遺傳背景有較大差異的萊蕪豬、培育品種魯萊黑豬、引入品種大白豬為研究對象,對豬磷酸酪氨酸互作結構域1(phosphotyrosine interactiondomain conta
2、ining1,PID1)基因進行了克隆表達分析,旨在為肉質(zhì)改良的MAS育種篩選有效的分子標記提供理論依據(jù)。研究結果如下:
以萊蕪豬為研究對象,利用兼并引物進行RT-PCR從萊蕪豬脂肪和肌肉組織中克隆PID1基因CDS區(qū)全序列(已提交NCBI,登錄號:GU1396255),并對其進行生物信息學分析。結果表明:PID1基因CDS區(qū)全長654 bp,編碼含217個氨基酸的蛋白,其定位在細胞質(zhì),分子量為54kDa,等電點為5.11
3、,蛋白功能預測發(fā)現(xiàn),PID1的C端有-PTB(磷酸酪氨酸作用位點)結構域,與IRS1、SHC中PTB結構域的結構相似,提示可能有相似的功能,在糖和脂肪代謝中發(fā)揮重要作用。
以萊蕪豬為研究對象,應用QRT-PCR技術研究PID1基因在萊蕪豬10個不同組織(心臟、背最長肌、脾臟、肝臟、肺臟、小腸、大腸、腦、脂肪、脊髓)的表達譜信息。結果表明:PID1基因在大多數(shù)組織中均有表達,其在各組織中的mRNA表達豐度表現(xiàn)為:心臟>腦>肝
4、臟>脂肪>背最長肌>肺臟>脊髓>大腸>脾臟,而在小腸中未見明顯表達,推測PID1基因在萊蕪豬的生長過程中起到廣泛的生物學作用,提示它調(diào)節(jié)目的基因轉(zhuǎn)錄具有廣泛性。
運用QRT-PCR技術,研究PID1基因在萊蕪豬、魯萊黑豬、大白豬三個豬種的脂肪、背最長肌和肝臟組織中的mRNA表達差異及其與IMF相關性,結果表明:豬品種因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應(P<0.05),總體表現(xiàn)為:萊蕪豬>魯萊黑豬>大白豬。組織因
5、素對PID1mRNA表達量具有顯著影響效應(P<0.05),總體表現(xiàn)為:肝臟>脂肪>肌肉。品種與組織之間的互作對該基因表達量也具有顯著影響效應(P<0.05);對于高IMF(LWH)、中等IMF(LWI)和低IMF(LWL)沉積的3組萊蕪豬,IMF沉積因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應(P<0.05),總體表現(xiàn)為:LWH>LWI>LWL。組織因素對PID1 mRNA表達量具有顯著影響效應(P<0.05),總體表現(xiàn)為:肝臟>脂
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