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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究環(huán)境溫度對(duì)小鼠角膜上皮創(chuàng)傷后修復(fù)過(guò)程的的影響。
材料與方法:
用機(jī)械創(chuàng)傷的方法對(duì)7~9周大雄性C56BL/6小鼠雙眼角膜上皮進(jìn)行創(chuàng)傷,后均分成三組,分別進(jìn)行常溫、低溫和高溫處理;在0h、3h、6h、12h、18h、24h、30h取出完整的角膜,并采用以下方法進(jìn)行染色和觀察:使用PE-anti-CD31(PE-PECAM-1)對(duì)角膜緣血管進(jìn)行熒光染色并使用Delta Vision Core進(jìn)行觀察
2、和記錄血管主干直徑的動(dòng)態(tài)變化;使用FITC-anti-Gr-1以及DAPI對(duì)角膜嗜中性粒細(xì)胞及細(xì)胞核進(jìn)行染色,使用熒光顯微鏡觀察并記錄嗜中性粒細(xì)胞的增殖和遷移情況;使用DAPI對(duì)角膜上皮增殖的基底細(xì)胞核進(jìn)行染色,并使用熒光顯微鏡觀察和記錄基底細(xì)胞的分裂情況;DAPI進(jìn)行熒光染色后,顯微鏡下可獲取角膜上皮層損傷面積和角膜上表面輪廓,使用相關(guān)軟件計(jì)算出角膜上皮的愈合率。
結(jié)果:
環(huán)境高溫和低溫對(duì)小鼠角膜上皮創(chuàng)傷后修復(fù)都有
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