多種生長(zhǎng)因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞增殖分化的影響.pdf

1、目的:通過(guò)體外建立并比較不同“多種生長(zhǎng)因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”，尋找促進(jìn)人胚肺成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)增殖分化最佳釋放系統(tǒng)。
　　方法:測(cè)定培養(yǎng)基中“纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”釋放曲線，加入生長(zhǎng)因子復(fù)合物（PDGF、TGF、VEGF、EGF），建立“多種生長(zhǎng)因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”。取傳至3~5代人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，分為有生長(zhǎng)因子實(shí)驗(yàn)組A和無(wú)生長(zhǎng)因子對(duì)照組B兩組，每組分4亞組：①纖維蛋白凝膠全覆蓋組（A1、B1組）②纖維蛋白原

2、全覆蓋組（A2、B2組）③島狀凝膠組（A3、B3組）④碎片狀凝膠組（A4、B4組），設(shè)置無(wú)凝膠對(duì)照組C：生長(zhǎng)因子組（C1組）、無(wú)生長(zhǎng)因子組（C2組）。連續(xù)觀察7~14天，觀察細(xì)胞形態(tài)，測(cè)定細(xì)胞數(shù)，并用MTT法測(cè)定相對(duì)細(xì)胞活性，觀察比較不同釋放系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響。
　　結(jié)果:（1）不同凝膠釋放系統(tǒng)釋放曲線的差異：島狀與碎片狀組凝膠釋放無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），纖維蛋白凝膠全覆蓋組與島狀、碎片組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）

3、，全覆蓋組釋放高峰落后于島狀和碎片狀組。（2）A1、A2、B1、B2組均無(wú)細(xì)胞生長(zhǎng)，A3、A4、B3、B4組細(xì)胞生長(zhǎng)良好，增殖活躍。（3）凝膠內(nèi)帶細(xì)胞生長(zhǎng)增殖最慢，外帶最快，中帶介于兩者之間。隨著凝膠溶解，細(xì)胞向內(nèi)帶遷移，增殖速度逐漸增快。（4）生長(zhǎng)因子組細(xì)胞增殖速度明顯快于無(wú)生長(zhǎng)因子組（P<0.001）。（5）生長(zhǎng)因子組細(xì)胞生長(zhǎng)情況：A4組優(yōu)于A3組及C1組，A3組優(yōu)于C1組（P<0.001）；無(wú)生長(zhǎng)因子細(xì)胞生長(zhǎng)情況：B4組優(yōu)于B3、

4、C2組，而C2組生長(zhǎng)情況優(yōu)于B3組（P<0.001）。（6）細(xì)胞增殖情況評(píng)估細(xì)胞計(jì)數(shù)法和MTT法測(cè)得OD值存在一定線性關(guān)系，并呈正相關(guān)關(guān)系（生長(zhǎng)因子組：A3組r=0.929，P<0.001；A4組r=0.863，P<0.001；C1組r=0.716，P<0.005。無(wú)生長(zhǎng)因子組：B3組r=0.706，P<0.005；B4組r=0.423，P<0.05；C2組r=0.512，P<0.05)。
　　結(jié)論:1、多種生長(zhǎng)因子復(fù)合物纖維蛋白