Duffy抗原-趨化因子受體與白介素-8在高血壓炎癥反應(yīng)中的變化及作用.pdf

1、目的：探討在高血壓炎癥反應(yīng)中Duffy抗原/趨化因子受體(Duffy antigen/receptor for chemokine，DARC)和其配體白介素-8(interleukin-8，IL-8)的變化及可能的作用，豐富炎癥反應(yīng)在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。 方法：在體實(shí)驗(yàn)部分：收集30例原發(fā)性高血壓患者(EH組)，按血壓水平分為1級高血壓組和2級高血壓組，及20例正常健康人(NC組)，分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme

2、linked immunosorbentassay，ELISA)檢測血漿IL-8水平，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(realtime-polymerase chain reaction，realtime-PCR)法檢測紅細(xì)胞DARC mRNA的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)部分：體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells from human umbilical vein，HUVEC)，分為對照組、AngⅡ(10-7M)組和AngⅡ(1

3、0-6 M)組，分別用磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution，PBS)、10-7M和10-6MAngⅡ誘導(dǎo)0～24小時(shí)，收集0、6、12、24小時(shí)四個(gè)時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)液和內(nèi)皮細(xì)胞，采用ELISA法分別檢測細(xì)胞培養(yǎng)液和細(xì)胞裂解液IL-8水平，采用realtime-PCR法檢測內(nèi)皮細(xì)胞DARC mRNA的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：在體實(shí)驗(yàn)部分：原發(fā)性高血壓組血漿IL-8水

4、平在1級高血壓組為(102.25±21.01)pg/ml，2級高血壓組為(105.93±18.93)pg/ml，均高于對照組(66.70±13.37)pg/ml，提示IL-8可能與高血壓炎癥有關(guān)。紅細(xì)胞DARC mRNA表達(dá)水平在1級高血壓組為2.31±0.58(相對定量)，2級高血壓組為3.13±0.84(相對定量)，均高于對照組1.11±0.51(相對定量)，提示DARC可能與高血壓有關(guān)。 體外實(shí)驗(yàn)部分：10-7MAngⅡ、

5、10-6MAngⅡ均能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生釋放IL-8，且存在時(shí)間依賴性，6小時(shí)可檢測到細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-8水平升高，12小時(shí)達(dá)高峰，24小時(shí)則降低；細(xì)胞裂解液反映細(xì)胞內(nèi)IL-8水平，也存在時(shí)間依賴性，但其變化與細(xì)胞培養(yǎng)液不平行，為6～24小時(shí)內(nèi)逐漸升高，提示可能與內(nèi)皮細(xì)胞DARC結(jié)合培養(yǎng)液中IL-8有關(guān)。AngⅡ可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞DARC mRNA表達(dá)，且存在時(shí)間依賴性，6～24小時(shí)逐漸增加，支持內(nèi)皮細(xì)胞DARC結(jié)合固定IL-8的功能。