有先兆偏頭痛大鼠三叉神經(jīng)脊束核基因表達(dá)譜的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院中國人民解放軍總醫(yī)院博士學(xué)位論文有先兆偏頭痛大鼠三叉神經(jīng)脊束核基因表達(dá)譜的實(shí)驗(yàn)研究姓名：劉若卓申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：于生元20080527軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士學(xué)位論文取出延髓及上頸段(至頸2)，抽提RNA，并使用紫外定量和變性凝膠電泳質(zhì)檢，合成雙鏈cDNA，進(jìn)行純化，體外轉(zhuǎn)錄合成生物素標(biāo)記cRNA，純化、定量和檢測，片段化、檢測，進(jìn)行芯片雜交，清洗染色，將芯片放入基因芯片掃描儀3000進(jìn)行掃描，

2、使用GeneChipoperatingsoftware(GCOS)對掃描圖像進(jìn)行處理分析，獲得數(shù)據(jù)。使用SAM軟件進(jìn)行處理篩選出差異基因；使用CB—MAS一40一生物分子功能注釋系統(tǒng)(MAS)把挑選出的差異表達(dá)基因進(jìn)行了Pathway和GO的統(tǒng)計(jì)分析，分別對差異基因進(jìn)行了進(jìn)一步的功能分類。3有先兆偏頭痛三叉神經(jīng)脊束核變化基因的功能分析：采用實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)的方法對差異基因中的4個(gè)進(jìn)行驗(yàn)證，使用生物信息學(xué)方法分析差異基因的功能。綜合評價(jià)

3、CSD參與有先兆偏頭痛的分子生物學(xué)機(jī)制結(jié)果：1采用高K腦皮層微量注射的方法成功誘發(fā)CSD，建立有先兆偏頭痛模型，與對照組相比，電生理記錄圖顯示高K注射后出現(xiàn)明顯的電信號的抑制和翻轉(zhuǎn)。2AffymetrixRatGenomearray23020芯片全基因組31099個(gè)轉(zhuǎn)錄子中，根據(jù)detectionPvalue004為“present”，對照組三叉神經(jīng)脊束核共檢測到20025個(gè)，占總數(shù)的6439％，而CSD實(shí)驗(yàn)組三叉神經(jīng)脊束核共檢測到20