重組類人膠原蛋白基因工程菌發(fā)酵動力學.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、膠原蛋白由于具有良好的生物相容性、弱抗原性和可生物降解性等優(yōu)良特性，而在醫(yī)藥衛(wèi)生等諸多領域有廣泛的應用。本文在本實驗室已成功構建的表達類人膠原蛋白的重組畢赤酵母基因工程菌GS115/pPIC9KG6的基礎上，用響應面分析法(RSM)優(yōu)化了其在搖瓶培養(yǎng)中的發(fā)酵條件。采用Box-Behnken Design(BBD)考察初始誘導pH值、溫度和甲醇添加量三個主要影響因子對產物類人膠原蛋白表達量的影響。響應面分析確定的最優(yōu)因素水平組合為：初始誘

2、導pH值為4.7，溫度28℃，甲醇添加量為2.1％/24h。在此基礎上利用Bioengineering KLF2000，3.7L自控發(fā)酵罐構建了畢赤酵母工程菌株的補料-分批發(fā)酵過程菌體的非結構生長模型、產物形成模型、限制性底物甘油和甲醇的消耗模型，為優(yōu)化發(fā)酵工藝控制策略提供理論依據。 利用離子交換層析和凝膠過濾層析對發(fā)酵產物進行組合分離純化，得到電泳純表達產物，通過紫外光譜和紅外光譜的譜圖分析，表明產物類人膠原蛋白具有與天然膠原

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