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文檔簡介
1、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接懶⌒拓i復(fù)合麻醉劑(XFM)及其頡頏劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)AMPK的影響,明確AMPKα1 mRNA、AMPKα2 mRNA、AMPK蛋白和p-AMPK蛋白在麻醉和催醒過程中的變化趨勢,探討XFM及其頡頏劑在麻醉過程中的的相互作用機(jī)制,為臨床麻醉及科學(xué)研究提供依據(jù)。
將90只SD大鼠隨機(jī)分為三組:XFM麻醉組(M組)(n=30)、小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑組(W組)(n=30)、XFM與頡頏劑交互組(MW組)(n=30)。
2、其中M組又分為5個(gè)亞組,分別為:C1組(腹腔內(nèi)注射與XFM等體積的0.9%NaCl)、M1組(腹腔注射XFM后10min)、M2組(腹腔注射XFM后20min)、M3組(腹腔注射XFM后40min)、M4組(腹腔注射XFM后1h);W組也分為5個(gè)亞組,分別為:C2組(腹腔內(nèi)注射與頡頏劑等體積0.9%NaCl)、W1組(腹腔注射頡頏劑后10min)、W2組(腹腔注射頡頏劑后20min)、W3組(腹腔注射頡頏劑后40min)、W4組(腹腔注
3、射頡頏劑后1h);MW組也分為5個(gè)亞組,分別為:C3組(腹腔內(nèi)注射與XFM等體積的0.9%NaCl10min后,注射與頡頏劑等體積的0.9%NaCl)、MW1組(腹腔注射XFM10min后,注射其頡頏劑10min)、MW2組(腹腔注射XFM10min后,注射其頡頏劑20min)、MW3組(腹腔注射XFM10min后,注射其頡頏劑40min)、MW4組(腹腔注射XFM10min后,注射其頡頏劑1h)。各組別到達(dá)預(yù)定時(shí)間后迅速處死并取腦,將
4、大鼠大腦皮層、小腦、丘腦、腦干及海馬這五個(gè)腦區(qū)分離開,用RT-PCR技術(shù)測定各腦區(qū)AMPKα1和AMPKα2基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量,WB測定各腦區(qū)AMPK蛋白和p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
1.XFM能使大鼠各腦區(qū)內(nèi)AMPKα1 mRNA和AMPKα2 mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著升高;小腦、海馬、丘腦和腦干內(nèi)p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著升高,且mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)的變化較為一致。
2
5、.小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑能使大鼠各腦區(qū)內(nèi)AMPKα2 mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低;大腦皮層和腦干內(nèi)AMPKα1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低,而丘腦內(nèi)則顯著升高;小腦、海馬和腦干內(nèi)p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著降低。
3.小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑催醒XFM麻醉的大鼠后,能使大鼠大腦皮層和腦干內(nèi)AMPKα1mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低,小腦、海馬和丘腦中則顯著升高;大腦皮層和海馬內(nèi)AMPKα2mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著升高,小腦、丘
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