腺病毒介導(dǎo)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體3對(duì)大鼠PC12細(xì)胞缺氧-再灌注損傷的基因治療.pdf_第1頁(yè)
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1、本實(shí)驗(yàn)利用腺病毒載體介導(dǎo)外源性基因葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體3(Glucosetransporter3，GLUT3)轉(zhuǎn)染大鼠PC12細(xì)胞探討缺氧—再灌注氧損傷時(shí)Ad-GLUT3對(duì)PC12細(xì)胞的保護(hù)情況及抗凋亡機(jī)制。 研究方法和結(jié)果：在HEK—293細(xì)胞內(nèi)大量擴(kuò)增腺病毒，濃縮，純化并轉(zhuǎn)染大鼠嗜鉻瘤細(xì)胞(PC12)證明它具有感染活性和表達(dá)活性。攜帶綠色熒光蛋白(greenfluoresecentprotein，GFP)的重組腺病毒Ad-GFP感染

2、大鼠嗜鉻瘤細(xì)胞(PC12)的實(shí)驗(yàn)表明，腺病毒對(duì)PC12細(xì)胞有較高的轉(zhuǎn)染率，而且毒性較低。在建立大鼠嗜鉻瘤細(xì)胞(PC12)缺氧—再灌注氧損傷模型的基礎(chǔ)上，使用Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染PC12細(xì)胞，流式細(xì)胞儀法和TUNEL法進(jìn)行凋亡分析顯示，Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染組的凋亡率較對(duì)照組明顯降低(P＜0.05)，使用同位素放射的方式分析葡萄糖代謝情況，Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染組的葡萄糖吸收率較對(duì)照組明顯提高(P＜0.05)。本實(shí)驗(yàn)也使用Western-Bl

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