高糖、晚期糖基化終末產(chǎn)物及胰島素對大鼠血管平滑肌細胞增殖和MCP-1分泌的影響.pdf

1、研究背景及目的：糖尿病是世界上嚴重危害人類健康的三大非傳染性疾病之一。近年來的研究顯示糖尿病不僅是冠心病的“等危癥”，同時也是介入治療后再狹窄發(fā)生的首要臨床相關因素。糖尿病特征性的糖、脂代謝紊亂和胰島素水平的改變可能是造成糖尿病大血管并發(fā)癥的重要原因。炎癥在動脈粥樣硬化和再狹窄的發(fā)病過程中起了重要作用，血管平滑肌細胞的增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)變等生物學行為的改變促進了動脈粥樣硬化的進展和血管損傷后新生內(nèi)膜的形成。單核細胞趨化蛋白-1（Mono

2、cyte chemoattractant protein-1, MCP-1）是一種主要作用于單核/巨噬細胞的CC型趨化因子，可促進單核細胞向血管內(nèi)膜的遷移并轉(zhuǎn)化為巨噬細胞，分泌炎癥因子，加劇血管壁內(nèi)的炎癥反應。晚期糖基化終末產(chǎn)物（Advancedglycation end products, AGEs）是一組蛋白質(zhì)、脂類和核酸經(jīng)非酶糖基化反應而形成的產(chǎn)物，在糖尿病狀態(tài)下明顯增加，糖基化血清白蛋白（glycation serum albu

3、min,GSA）是其中重要的一種。鑒于糖尿病在動脈粥樣硬化和再狹窄發(fā)病中的重要作用，本實驗采用GSA模擬AGEs，研究葡萄糖、胰島素和AGEs這些糖尿病相關因素對血管平滑肌細胞增殖和分泌致炎性趨化因子MCP-1的影響及其相互作用，探討糖尿病引起動脈粥樣硬化和再狹窄發(fā)生率增加的可能作用機制。 研究方法：采用組織貼塊法培養(yǎng)原代大鼠血管平滑肌細胞，用平滑肌特異的α-actin 抗體進行免疫熒光鑒定。取第3～8 代細胞用于實驗，分別加入

4、不同濃度的葡萄糖、胰島素、GSA，以及葡萄糖+胰島素或GSA+胰島素，用MTT 法檢測血管平滑肌細胞的增殖，ELISA 檢測法測定細胞上清中MCP-1 的含量。實驗結(jié)果用Prism 4.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。 研究結(jié)果：實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1. 胰島素和GSA 可分別促進大鼠血管平滑肌細胞的增殖，而高糖本身不能促進其增殖；2. 胰島素和GSA 共同作用與其各自單獨作用相比，促進血管平滑肌細胞增殖的作用更強，而高糖和胰島素共同作用與

5、胰島素單獨作用相比，對血管平滑肌細胞的增殖沒有相加作用；3. GSA 可以濃度和時間依賴地促進大鼠血管平滑肌細胞分泌致炎性趨化因子MCP-1，而高糖則無此作用；4. 細胞增殖校正后，胰島素可抑制大鼠血管平滑肌細胞分泌致炎性趨化因子MCP-1，而且還可抑制GSA 引起的MCP-1 分泌的增加。 結(jié)論：胰島素水平的升高既能促進血管平滑肌細胞的增殖，同時可能也存在一定的抗炎作用；而GSA 不僅能協(xié)同胰島素的促增殖效應，而且可能通過其致