低聲壓級水平次聲治療神經(jīng)病理性疼痛的實(shí)驗(yàn)觀察及機(jī)制研究.pdf

1、目的： 次聲是頻率在0.0001～20Hz范圍的聲波，它是由物體的機(jī)械振動(dòng)產(chǎn)生的，次聲物理學(xué)特點(diǎn)是頻率低，波長大，穿透力強(qiáng)。由于人及動(dòng)物組織器官的固有振蕩頻率在20Hz以下（即在次聲的頻率范圍內(nèi)），故處于次聲場內(nèi)的人及動(dòng)物的組織器官會(huì)對次聲波產(chǎn)生共振（即次聲的生物共振效應(yīng)）。目前，有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，次聲的生物共振效應(yīng)可對組織器官的細(xì)胞產(chǎn)生生物機(jī)械力作用，后者可影響細(xì)胞的基因表達(dá)，從而影響細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。高聲壓級水平次聲可損傷組織

2、器官已被實(shí)驗(yàn)和生活實(shí)踐所證實(shí)，但近年來有學(xué)者指出，低聲壓級水平次聲可能對組織器官有良好的調(diào)整作用，國內(nèi)外一些科研機(jī)構(gòu)也正在進(jìn)行次聲用于臨床方面的嘗試。本文擬試用低聲壓級水平（70～85dB）次聲治療神經(jīng)病理性疼痛，從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疼痛行為改變和脊髓膠質(zhì)細(xì)胞激活狀態(tài)的改變兩方面來觀察低聲壓級水平次聲對神經(jīng)病理性疼痛的影響，為低聲壓級水平次聲的開發(fā)利用提供參考。 實(shí)驗(yàn)方法： 1、成功造模（L5脊神經(jīng)結(jié)扎的神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型）

3、的150～180g SD大鼠16只，隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對照組，每組8只。所有大鼠在術(shù)后第4天開始次聲治療（實(shí)驗(yàn)組）或假次聲治療（對照組），4h/d，療程28天。從治療的第二天開始隔日檢測50％機(jī)械性撤足閾值（paw withdrawal threshold）和熱刺激撤足潛伏期（paw withdrawal latency），比較實(shí)驗(yàn)組和對照組的50％機(jī)械性撤足閾值和熱刺激撤足潛伏期的有無差異。 2、12只150～180g SD大鼠

4、，隨機(jī)分成3組：空白組，假手術(shù)組，手術(shù)組，每組4只。手術(shù)組行L5脊神經(jīng)結(jié)扎術(shù)，假手術(shù)組在手術(shù)過程中除不結(jié)扎L5神經(jīng)以外，其余同手術(shù)組，空白組不做處理。術(shù)后第10天將12只大鼠灌注固定后取出L5脊髓節(jié)段，用ABC法做免疫組織化學(xué)檢查。用OX—42抗體顯示小膠質(zhì)細(xì)胞，用GFAP抗體顯示星形膠質(zhì)細(xì)胞。比較手術(shù)組、假手術(shù)組、空白組小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活情況。 3、48只成功造模的SD大鼠，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)和對照兩組，每組24只。實(shí)驗(yàn)

5、組和對照組又按次聲治療或假治療的療程分別分成四個(gè)小組：即實(shí)驗(yàn)7d組，實(shí)驗(yàn)14d組，實(shí)驗(yàn)21d組，實(shí)驗(yàn)28d組，對照7d組，對照14d組，對照21d組，對照28d組，每組6只。實(shí)驗(yàn)各小組都予次聲治療，4h/d，分別連續(xù)治療7d、14d、21d、28d；對照各小組予假次聲治療，即在相同的環(huán)境及時(shí)間點(diǎn)關(guān)閉次聲機(jī)開關(guān)，不輸出次聲波。在預(yù)定治療天數(shù)結(jié)束的當(dāng)天，在完成最后一次次聲治療后，該小組大鼠都被灌注固定后取出L5節(jié)段做免疫組織化學(xué)。比較實(shí)驗(yàn)和

6、對照相同療程組小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活有無差異。 結(jié)果： 1、在次聲治療的第12～16天，實(shí)驗(yàn)組與對照組50％機(jī)械性撤足閾值的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組大于對照組；在次聲治療的第12～14天，實(shí)驗(yàn)組與對照組熱刺激撤足潛伏期的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組長于對照組，在其余時(shí)間段兩組雖有差異，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、空白組、假手術(shù)組脊髓后角兩側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)目和形態(tài)無明顯差

7、異，手術(shù)組脊髓后角術(shù)側(cè)和對側(cè)比較，小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目有明顯差異（P<0.01），術(shù)側(cè)后角小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目均明顯多于對側(cè)。術(shù)側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞均呈激活狀態(tài)：胞體肥大，數(shù)目增多。 3、實(shí)驗(yàn)14d組和對照14d組小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活出現(xiàn)顯著差異（以平均灰度比較，P<0.05）。實(shí)驗(yàn)14d組小膠質(zhì)細(xì)胞仍可見少量粗短突起，細(xì)胞間重疊不明顯，對照14d組突起基本消失，增生重疊較多，已不能分辨單個(gè)小膠質(zhì)

8、細(xì)胞；實(shí)驗(yàn)14d組和對照14d組星形膠質(zhì)細(xì)胞之間的差異主要表現(xiàn)在胞體及突起的肥大增粗程度方面，實(shí)驗(yàn)14d組弱于對照14d。在其余治療時(shí)間段小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞激活程度差異不明顯。 結(jié)論： 1、低聲壓級次聲（70～85dB）治療神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型，4h/d，可在一定程度上改善大鼠的疼痛行為，其作用有一定的規(guī)律性：在治療的早期和后期對痛閾影響不大，在治療的一段時(shí)間后可提高痛閾，提示次聲產(chǎn)生生物效應(yīng)有一定的潛伏期，生物