社區(qū)獲得性腹瀉病原菌耐藥性及鼠傷寒沙門菌對(duì)喹諾酮類藥物耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的和意義 調(diào)查武漢社區(qū)獲得性腹瀉病原菌的構(gòu)成及其主要病原菌—鼠傷寒沙門菌對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥情況，并對(duì)其主要耐藥機(jī)制和耐藥基因型進(jìn)行研究。闡明武漢社區(qū)獲得性腹瀉病原菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性及鼠傷寒沙門菌的分子流行病學(xué)特征，為指導(dǎo)臨床合理用藥，新藥研究及疫苗開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。 方法 收集2004年6月30日～2004年10月31日武漢地區(qū)四所大型醫(yī)院門診腹瀉患者糞便標(biāo)本4536份，無菌棉拭子挑取可疑部分，立即插入

2、卡—布運(yùn)送培養(yǎng)基中，當(dāng)天接種，以木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、改良半固體氯化鎂孔雀綠培養(yǎng)基、賴氨酸鐵培養(yǎng)基分離鑒定病原菌。瓊脂稀釋法檢測(cè)細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物的最低抑菌濃度(miniminhibitionconcentration，MIC)，并抽提鼠傷寒沙門菌的基因組DNA，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction，PCR)方法檢測(cè)喹諾酮類抗菌藥物作用于鼠傷寒沙門菌的靶位點(diǎn)。重復(fù)基因外回文序列聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

3、(repetitiveextragenicpalindromicsequencespolymerasechainreaction,REP-PCR)對(duì)32株鼠傷寒沙門菌進(jìn)行基因分型，并與生物學(xué)分型和耐藥結(jié)果比較。 結(jié)果 4536份糞便標(biāo)本中，分離出非傷寒沙門菌64株(1.4％)，志賀菌29株(0.6％)，致病性大腸桿菌33株(0.7％)，在非傷寒沙門菌中鼠傷寒沙門菌占51.6％(33株)。非傷寒沙門菌、志賀菌和致病性大腸桿

4、菌對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率分別為39.1％，6.9％和12.1％；它們對(duì)氨芐西林、四環(huán)素、萘啶酸和復(fù)方新諾明的耐藥率都超過50％；非傷寒沙門菌對(duì)第三代頭孢菌素的耐藥率＜5％，仍保持較好的敏感性。 33株鼠傷寒沙門菌對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率為72.7％，MIC值達(dá)4～16ug/ml。24株對(duì)環(huán)丙沙星耐藥的鼠傷寒沙門菌中均存在gyrA位點(diǎn)突變，22株存在gyrA和parC雙重突變。本實(shí)驗(yàn)選取數(shù)株各個(gè)水平MIC值的鼠傷寒沙門菌進(jìn)行分析，未見gyr

5、B和parE位點(diǎn)發(fā)生突變，但發(fā)現(xiàn)可疑堿基插入。采用REP-PCR技術(shù)對(duì)32株鼠傷寒沙門菌進(jìn)行基因分型，獲得a、b、c、d、e、f、g、h、x共9型，其中以a型為主共19株(59.4％)，為主要流行株。 結(jié)論 武漢地區(qū)社區(qū)感染性腹瀉的病原菌以非傷寒沙門菌為主，其中鼠傷寒沙門菌占非傷寒沙門菌的51％，其次是致病性大腸桿菌和志賀菌。這些致病菌對(duì)腸道桿菌常用抗菌藥物如氨芐西林、復(fù)方新諾明的耐藥率超過50％。鼠傷寒沙門菌感染對(duì)喹諾