馬勃化學(xué)成分的分離、鑒別及對組織蛋白酶L抑制作用研究.pdf

1、本論文的主要工作是對馬勃的化學(xué)成分進(jìn)行分離和鑒定及對其組織蛋白酶L抑制作用進(jìn)行研究。
　　馬勃是真菌類中藥,具有止血、抗菌、抗癌和抗炎止咳等功效。
　　Cathepsin L是一類嗜酸性的蛋白酶,Cathepsin L的表達(dá)和活性受到嚴(yán)格的調(diào)控,如果其表達(dá)出現(xiàn)異常,將導(dǎo)致一系列疾病包括癌癥和心血管病等的發(fā)生。為了對這些疾病進(jìn)行防治,就必須抑制Cathepsin L的活性。研究表明,馬勃對Cathepsin L具有良好抑制作用

2、,意味著馬勃含的某些活性組分,有可能成為下一代的抗癌等疾病的藥物。如果能夠鑒別出這種活性組分,將產(chǎn)生重大的社會和經(jīng)濟(jì)效益,造福于社會。
　　鑒于這種情況,本文進(jìn)行了馬勃化學(xué)成分的分離和鑒別,并將分離出的組分進(jìn)行Cathepsin L抑制作用研究。
　　采用分析型HPLC優(yōu)化分離條件,常規(guī)制備型HPLC進(jìn)行重復(fù)制備和二維Sepbox制備色譜進(jìn)行高通量制備得到活性組分,并將分離出來的組分進(jìn)行活性測試。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:二維Sepbo

3、x高通量制備方案優(yōu)于常規(guī)制備HPLC分離制備方案。
　　應(yīng)用LC-IT-TOFMS對得到的一個活性較高組分進(jìn)行分析和結(jié)構(gòu)鑒定,結(jié)果表明,此組分含有5種化合物,并推斷出一種化合物的結(jié)構(gòu),命名為1,2-二氫-2-羥基-5,10-二氧苯并喹啉-9-羧酸。對其進(jìn)行分子對接技術(shù)研究,與文獻(xiàn)報道的活性位點(diǎn)一致,此方法為新藥研發(fā)提供了新的研究思路。
　　將不同前處理方法(頂空、超臨界CO2、不同溶劑超聲)得到的馬勃提取物進(jìn)行Catheps

4、in L活性測試,并應(yīng)用GC-MS對其化學(xué)成分進(jìn)行研究,對各種前處理方法所得化合物的相對含量進(jìn)行了分析?？偣茶b別得到62種化合物,其中,HS-SPME-GCMS得到19種化合物,主要為烷烴類和嗎啉衍生物;SFE-CO2鑒別得到24種化合物,此方法得到的酰胺類化合物種類和含量極高;不同溶劑超聲萃取得到17~26種化合物,得到的化合物類型與所用溶劑有關(guān)。
　　產(chǎn)自內(nèi)蒙和吉林的馬勃對Cathepsin L抑制效果不同,采用掃描電鏡(SE