針灸對CTX小鼠骨髓有核細胞DNA含量、細胞周期、細胞凋亡的影響.pdf

1、目的 本課題采用環(huán)磷酰胺(CTX)腹腔注射造成昆明種小鼠白細胞減少的模型，通過對外周白細胞計數(shù)、骨髓有核細胞DNA含量、各系細胞周期、細胞凋亡指數(shù)等指標的檢測，進而從分子生物學的層次來探討針刺、艾灸的方法對化療后小鼠造血功能的保護機理。 方法 把實驗小鼠隨機分為模型組、針刺組、艾灸組、正常組。對模型組、針刺組、艾灸組小鼠通過腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)100mg/kg/d，連續(xù)3天，第3天停藥后4小時即造出昆明種小

2、鼠的白細胞減少模型。正常組腹腔注射同體積生理鹽水，連續(xù)3天，按照造模時間的先后順序，在停藥后4小時模型即成。造模結(jié)束后4小時針刺組、艾灸組按造模順序進行治療。選用穴位有“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”。針刺組用28號1寸針灸進行針刺，進針0.2～0.3mm，行平補平瀉，留針10mm，每日1次，連續(xù)5天；艾灸組用自制艾炷灸，每天1次，每次每穴4壯，連續(xù)5天。模型組、正常組陪同固定。模型組、針刺組、艾灸組中各組分2批，每批8只，在治

3、療的第52小時(第3天)、第100小時(第5天)，按治療時間的先后順序，分2批隨機處死小鼠取材。分別用自動生化分析儀和流式細胞儀進行外周血白細胞計數(shù)、骨髓有核細胞DNA含量、各系細胞周期、細胞凋亡指數(shù)等指標的檢測。 結(jié)果 1對外周血白細胞的影響：在治療第3天、第5天后針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.01和P<0.001，統(tǒng)計學處理有差異和顯著性差異；針刺組與艾灸組比較P<0.05，有統(tǒng)計學差異；說明針刺組和艾灸組可以提高外周血

4、白細胞數(shù)量，并且艾灸組優(yōu)于針刺組。 2對骨髓有核細胞DNA含量的影響：通過對實驗結(jié)果中DNA含量進行統(tǒng)計對比，顯示模型組顯著低于正常組(P<0.001)，說明腹腔注射環(huán)磷酰胺可以造成小鼠骨髓有核細胞DNA含量水平的顯著下降；針刺組：艾灸組與模型組比較P<0.05和P<0.01，差別有顯著性意義；針刺組、艾灸組第3天與第5天比較P<0.05，統(tǒng)計學處理有意義，說明針刺和艾灸治療均可以升高骨髓有核細胞的DNA含量，并且在一定的治療時

5、段內(nèi)隨著治療次數(shù)的增加效果會相應(yīng)增加；針刺組與艾灸組比較P<0.05，統(tǒng)計學處理有意義，說明艾灸組在療效上要優(yōu)于針刺組。 3對骨髓有核細胞細胞周期的影響：對骨髓有核細胞G<,1>期的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計顯示，正常組與模型組比較P<0.001，統(tǒng)計學處理有極顯著性差異，說明腹腔注射環(huán)磷酰胺可以造成小鼠骨髓有核細胞G<,1>期阻滯；針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.05和P<0.01，統(tǒng)計學處理有差異和顯著性差異，說明針刺組和艾灸組可以顯著

6、降低骨髓細胞G<,1>期的時相，并且艾灸組優(yōu)于針刺組；對G<,2>、S期的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.01和P<0.001，統(tǒng)計學處理有顯著性差異和極顯著性差異；針刺組與艾灸組比較P<0.05，兩組在統(tǒng)計學處理上有差異；說明針刺組和艾灸組均可以顯著升高處于S期的骨髓細胞分裂水平，并且艾灸組優(yōu)于針刺組。 4對骨髓有核細胞凋亡的影響：在本次實驗中雖然只有少量標本測到了細胞的凋亡峰，但由于同批次實驗小鼠骨髓中出現(xiàn)了凋亡調(diào)節(jié)