骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)老年性骨質(zhì)疏松癥成骨作用影響的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：從理論角度分析總結(jié)老年性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病原因，并通過實(shí)驗(yàn)研究探討骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)化的影響，以及對(duì)成骨細(xì)胞衰變和凋亡的影響，從臨床角度觀察其治療老年性骨質(zhì)疏松癥的效果，為臨床應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。 方法：臨床研究：選擇股骨近端BMD較同性別年輕成人均值低2.5SD以上，診斷為老年性骨質(zhì)疏松癥者70例。采用隨機(jī)對(duì)照的方法，分為治療組(口服強(qiáng)骨膠囊)36例，對(duì)照組(口服鈣爾奇D)34例，依據(jù)對(duì)腰背痛及腰痛綜合評(píng)分進(jìn)

2、行動(dòng)態(tài)觀察；依據(jù)“疼痛VAS線段分級(jí)法”對(duì)腰背痛(靜止痛、翻身痛、久坐痛、起身痛、彎腰痛、步行痛、睡眠痛、叩擊痛、壓痛)進(jìn)行量化動(dòng)態(tài)觀察；依據(jù)“Barthel指數(shù)評(píng)定法”對(duì)老年性骨質(zhì)疏松癥日常生活活動(dòng)能力(ADL)進(jìn)行觀察；采用雙能X線骨密度儀對(duì)腰椎(L2-L4)、股骨近端各部位：股骨頸(Neck)、股骨三角區(qū)(Ward)、股骨粗隆(Troch)進(jìn)行骨密度(BMD)定量檢測(cè)；應(yīng)用放射免疫法對(duì)骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，骨形成指標(biāo)：骨鈣素(BGP

3、)、I型前膠原氨基端前肽(PINP)；骨吸收指標(biāo)：I型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ICTP)等，評(píng)價(jià)骨碎補(bǔ)總黃酮治療老年性骨質(zhì)疏松癥的臨床效果。實(shí)驗(yàn)研究：通過WST-8分析骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞活性的影響；以地塞米松誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)化后，建立脂肪細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)體系，用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清干預(yù)后，以TUNEL法檢測(cè)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的凋亡情況；采用三丁基過氧化氫(t—BHP)體外誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞衰老，用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血

4、清干預(yù)后，以SA—β-半乳糖苷酶(Se—nescence associated β-galactosidase)化學(xué)染色，觀察細(xì)胞衰老情況；將大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)于含有腫瘤壞死因子-α(TNF—α)或骨碎補(bǔ)總黃酮加TNF—α培養(yǎng)基中后，通過熒光染色細(xì)胞核DNA及電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察，檢測(cè)成骨細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：1.“疼痛六點(diǎn)行為評(píng)分法(BRS-6)”觀察結(jié)果顯示，治療前老年性骨質(zhì)疏松癥患者的腰背痛及腰痛多在III～V級(jí)之間，疼痛無法

5、忽視，對(duì)同常生活有一定的影響。運(yùn)用強(qiáng)骨膠囊(骨碎補(bǔ)總黃酮)治療3個(gè)月后疼痛分級(jí)多降至到I～I(xiàn)I級(jí)，自覺疼痛基本消失。說明骨碎補(bǔ)總黃酮在一定程度上能夠改善老年性骨質(zhì)疏松癥引起的腰背痛及腰痛，緩解疼痛的幅度以治療的前3個(gè)月最為明顯。2.“疼痛VAS線段分級(jí)法”觀察結(jié)果顯示，治療前靜止時(shí)腰背痛、久坐時(shí)腰背痛、步行時(shí)腰背痛均呈現(xiàn)中度疼痛，翻身時(shí)腰背痛、起身時(shí)腰背痛、彎腰時(shí)腰背痛、腰背壓痛與叩擊痛多表現(xiàn)重度疼痛，而以彎腰時(shí)腰背痛、腰背叩擊痛尤為顯

6、著，部分病人腰背痛對(duì)睡眠會(huì)有一定影響。運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療3個(gè)月后，各種行為方式引起的腰背痛均有不同程度的改善，其中治療1個(gè)月后腰背痛對(duì)睡眠的影響較小，治療2個(gè)月后多數(shù)靜止痛、久坐痛基本消失，治療3個(gè)月多數(shù)翻身痛、起身痛、步行痛、壓痛可緩解，但部分病人仍然呈現(xiàn)出一定程度的彎腰痛和腰背叩擊痛。由此可見，骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)老年性骨質(zhì)疏松癥病人靜態(tài)生活方式出現(xiàn)的腰背痛改善迅速且明顯，對(duì)動(dòng)態(tài)生活方式引起腰背痛加重，以及外界干預(yù)加重的腰背痛也有一定的

7、作用，但相對(duì)較慢。3.“Barthel指數(shù)評(píng)定法”對(duì)日常生活活動(dòng)能力(ADL)進(jìn)行觀察結(jié)果顯示：治療前多數(shù)病人Barthel指數(shù)評(píng)分為60～40分，表現(xiàn)中度殘疾，有功能障礙，生活需要幫助；治療3個(gè)月后積分可達(dá)到90分以上，生活基本自理，生活獨(dú)立性有一定程度的改善，生活質(zhì)量有很大提高。4.雙能X線骨密度儀對(duì)老年性骨質(zhì)疏松癥腰椎(L2-L4)、股骨近端各部位：股骨頸(Neck)、股骨三角區(qū)(ward)、股骨粗隆(Troch)進(jìn)行應(yīng)用骨碎補(bǔ)總

8、黃酮治療前后骨密度(BMD)定量檢測(cè)結(jié)果表明，應(yīng)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后各部位BMD均有一定程度的升高；與對(duì)照組(鈣爾奇D)相比，除外腰椎(L2-L4)的骨密度改善程度無差異，骨碎補(bǔ)總黃酮的治療效果更為明顯，二者對(duì)比，有顯著性差異。說明骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)老年性骨質(zhì)疏松癥具有提高整體骨量的作用，同時(shí)能夠提高股骨近端骨強(qiáng)度，預(yù)防髖部骨折。5.骨代謝標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果表明，老年性骨質(zhì)疏松癥BGP、PINP比較正常成年人均有一定程度降低，說明老年性骨

9、質(zhì)疏松癥成骨細(xì)胞功能衰退，合成膠原減少，成骨能力較弱；運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后，BGP、PINP均有一定程度上升，說明骨碎補(bǔ)總黃酮具有促進(jìn)低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥骨膠原的合成，提高骨轉(zhuǎn)換，增加骨形成等作用。老年性骨質(zhì)疏松癥ICTP比較正常成年人有一定程度升高，說明老年性骨質(zhì)疏松癥骨溶解增加，骨吸收相對(duì)較快。運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后，ICTP有一定程度上降低，說明骨碎補(bǔ)總黃酮具有減緩低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥骨吸收狀況的功效。6.骨碎補(bǔ)總黃酮含

10、藥血清對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞活性的影響研究結(jié)果表明，經(jīng)骨碎補(bǔ)總黃酮干預(yù)后大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞數(shù)量顯著增加，說明骨碎補(bǔ)總黃酮能夠提高大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的活性，并具有促進(jìn)其增殖分裂的作用。7.骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)TNF—α誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞凋亡的抑制作用研究結(jié)果表明，在用空白血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞中加入TNF—α，可見到成骨細(xì)胞出現(xiàn)凋亡征象，凋亡的成骨細(xì)胞顯著增多；而用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞，凋亡細(xì)胞明顯減少，雖然仍有細(xì)胞凋亡的形態(tài)改變，但可部分對(duì)

11、抗TNF—α所致的成骨細(xì)胞凋亡。8.骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對(duì)脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用研究結(jié)果表明，脂肪細(xì)胞能夠誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的凋亡，用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清干預(yù)后，凋亡細(xì)胞明顯減少，說明骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對(duì)脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用。9.骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)大鼠成骨細(xì)胞衰老的影響研究表明，經(jīng)t—BHP處理后的成骨細(xì)胞SA—β-半乳糖苷酶的細(xì)胞化學(xué)染色陽性的細(xì)胞數(shù)明顯增多，而用骨碎補(bǔ)總黃酮干預(yù)的衰老細(xì)胞明顯減少，說明骨碎

12、補(bǔ)總黃酮含藥血清對(duì)t—BHP誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞衰老具有保護(hù)作用。 結(jié)論：1.隨著人類壽命的延長(zhǎng)和人口老齡化，老年性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率逐漸增加，嚴(yán)重危害著老年人的健康和生命。2.老年性骨質(zhì)疏松癥是機(jī)體自然衰退、老化過程的組成部分，骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化方向改變和成骨細(xì)胞的生物學(xué)功能衰退是其發(fā)病的細(xì)胞病理學(xué)基礎(chǔ)，而五臟虛損和氣血功能紊亂與其發(fā)病密切相關(guān)，其中腎虛為其核心病機(jī)。3.臨床研究表明：骨碎補(bǔ)總黃酮具有促進(jìn)老年性骨質(zhì)疏松癥骨膠原的合

13、成，提高骨轉(zhuǎn)換，增加骨形成，減緩骨吸收狀況等作用，進(jìn)而提高老年性骨質(zhì)疏松的整體骨量，緩解腰背痛，提高股骨近端骨強(qiáng)度，預(yù)防髖部骨折，提升獨(dú)立性生活水準(zhǔn)，全面提高老年性骨質(zhì)疏松癥患者的生命質(zhì)量。4.實(shí)驗(yàn)研究表明：骨碎補(bǔ)總黃酮能夠提高大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的活性，促進(jìn)其增殖分裂，并對(duì)脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用，而且骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對(duì)TNF—α誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞凋亡和t—BHP誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞衰老均具有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果說