18F-FES的合成及其在乳腺癌細(xì)胞的示蹤作用研究.pdf

1、目的：
　　1.降低特異性雌激素受體顯像劑18F-氟雌二醇（18F-Fluoroestradio，18F-FES）的合成成本，完善質(zhì)量控制項(xiàng)目，滿足臨床用量及安全性需求。
　　2.明確18F-FES對(duì)不同乳腺癌雌激素受體（Estrogen receptor，ER）表達(dá)水平細(xì)胞的示蹤作用，并初步探討其機(jī)制。
　　方法：
　　1.正交試驗(yàn)（L1645）考察影響全自動(dòng)合成裝置（Tracerlab FXFN）自動(dòng)化合成1

2、8F-FES的因素，指標(biāo)為前體量（mg）、核素量（mci）、乙腈使用次數(shù)（次）、鹽酸濃度（mol/L）、水解溫度（℃），以合成率為主要判斷標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)選最佳合成條件。
　　2.根據(jù)獲得的最佳合成條件，比較使用國(guó)產(chǎn)及進(jìn)口兩種前體18F-FES的合成率及合成成本。
　　3.合成18F-FES的質(zhì)量控制及建立細(xì)菌內(nèi)毒素方法學(xué)。
　　4.體外培養(yǎng)人乳腺細(xì)胞株（MCF-10A）及乳腺癌細(xì)胞株（MCF-7，MDA-MB-231），分別

3、加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育15、30、60、90、120和150 min后，采用γ放射計(jì)數(shù)器測(cè)定放射性計(jì)數(shù)（CPM），分析細(xì)胞18F-FES攝取量。
　　5.ER拮抗劑他莫昔芬（Tamoxifen，TAM）（5、10、20μmol/L）處理MCF-7細(xì)胞24、48、72h，MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖；TAM處理72h的MCF-7細(xì)胞，加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育60min，免疫組化技

4、術(shù)（immuno-histochemistry，IHC）測(cè)定細(xì)胞ER表達(dá)，γ放射計(jì)數(shù)器測(cè)定CPM，分析細(xì)胞18F-FES攝取量。
　　結(jié)果：
　　l.影響18F-FES合成的重要因素為：乙腈使用次數(shù)>前體量>溫度>核素量>鹽酸濃度；合成率高低與國(guó)內(nèi)外前體來(lái)源無(wú)關(guān)，使用國(guó)內(nèi)前體合成成本低。
　　2.建立的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法顯示，18F-FES注射液每1 mL含細(xì)菌內(nèi)毒素量應(yīng)<5EU（EU，內(nèi)毒素單位），其1∶10倍的稀釋

5、液對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)無(wú)干擾作用。
　　3.體外培養(yǎng)的三種細(xì)胞株對(duì)18F-FES均有明顯攝取，18F-FES孵育90min攝取達(dá)峰。乳腺癌ER陽(yáng)性的MCF-7細(xì)胞攝取值遠(yuǎn)大于ER陰性的MDA-MB-231細(xì)胞及MCF-7細(xì)胞。
　　4.ER拮抗劑TAM明顯抑制MCF-7細(xì)胞增殖，呈時(shí)間劑量依賴性。細(xì)胞數(shù)減少，ER減少，MCF-7細(xì)胞18F-FES攝取值明顯下降。
　　結(jié)論：
　　1.在選定條件下，18F-FES的合成