9-羥基利培酮的手性拆分和利培酮的手性代謝研究.pdf

1、一、目的 建立9．羥基利培酮的手性拆分方法，研究利培酮和其活性代謝產(chǎn)物9一羥基利培酮手性異構(gòu)體的多劑量藥動(dòng)學(xué)，并研究利培酮的手性代謝機(jī)制，為深入研究利培酮活性成分藥動(dòng)學(xué)及其代謝機(jī)制提供參考，為制定更合理的臨床給藥方案提供依據(jù)。 二、方法 利用本實(shí)驗(yàn)室已采集的生物樣本進(jìn)行進(jìn)一步分析。本研究實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則：隨機(jī)，對照，齊同，開放性。 1．本部分實(shí)驗(yàn)前本實(shí)驗(yàn)室已完成的工作 1.1給藥方法和生物樣本的采集1

2、.1.1給藥方法于實(shí)驗(yàn)第一周將利培酮的給藥量逐步增加至2mg／bid(早晚7：00)的目標(biāo)劑量。以此劑量連續(xù)給藥5天，第13天晨給RIP2mg，晚不再給RIP，第15～18天給予RIP 2mg／bid+苯海拉明(BEZ)25mg／tid，第19天晨給RIP 2mg+BEZ 25mg，晚不再給RIP和BEZ。第21～30天給RIP 2mg／bid。其中分別在第13天和第19天早合并給右美沙芬(DM)15mg，第13、19天晚合并給咪達(dá)唑侖

3、(M)7.5mg。1.1.2利培酮及其代謝產(chǎn)物血樣采集分別于試驗(yàn)第13、19天晨服藥前及服藥后0.5，1.25，．2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12.0，24.0h由肘靜脈取血2～3ML置肝素化離心管中，分離血漿，置-80℃保存待測。 1.1.3咪達(dá)唑侖血樣采集 分別于試驗(yàn)第13、19天晚服咪達(dá)唑侖后1.0h由肘靜脈取血2～3mL置肝素管中,分離血漿,-80℃保存待測。 1.1.4右美沙芬尿樣采集分別于試驗(yàn)第

4、13、19天收集服利培酮和右美沙芬后0～8h的尿樣,準(zhǔn)確量取體積,置-80℃保存待測。 1.2HPLC-MS 測定DX和DM的濃度。 1.3 HPLC-DAD測定體內(nèi)咪達(dá)唑侖、1'-OH咪達(dá)唑侖血藥濃度。 2.本部分實(shí)驗(yàn)中所涉及的測定方法 2.1手性固定相法拆分9-Ott-RIP手性異構(gòu)體。 2.2 HPLC-MS和非手性-手性法測定體內(nèi)RIP、9-OH-RIP及其異構(gòu)體。 三、結(jié)果

5、 1.9-OH-RIP手性異構(gòu)體的拆分 建立了9-OH-RIP手性異構(gòu)體的拆分方法,以3.5[％]異丙醇為有機(jī)相,以50mM的醋酸銨為水相,較好地拆分了9-Ott-RIP手性異構(gòu)體;分離度達(dá)到1.36,分離因子達(dá)到1.80。 2.生物樣本測定 用非手性.手性法測定RIP與9-OH-RIP及其手性異構(gòu)體。RIP、9-OH-RIP、(+)9-OH-RIP和(-)9-OH-RIP分別在2.20～220μg·L<'-1

6、>、1.44～275.30gg-L～、0.73～137.65μg·L<'-1>和0.73～137.65μg·L<'-1>濃度范圍線性良好。方法回收率均在90.90[％]～105.24[％]范圍內(nèi),日內(nèi)和日間RSD皆小于7.38[％]。 3.砒P與9-OH-RIP及其手性異構(gòu)體多劑量臨床藥物動(dòng)力學(xué) 所測樣品RIP與9-OH-RIP藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與文獻(xiàn)報(bào)道接近。9-羥基利培酮手性異構(gòu)體血藥濃度、曲線下面積及半衰期均存在較大差異，

7、(+)9-OH-RIP與(-)9-OH-RIP的C<,min><'ss>分別為44.74±16.04和21.12±9.24ug·L<'-1>，C<,min><'ss>分別為113.8±35.7和40.6±15.0ug·L<'-1>，AUC<,0-48><'SS>分別為1793.9±700.7和826.3±297.8lug·h·L<'-1>，t<,1／2>分別為23.8±8.7和42.0±27.6h。 4．苯海拉明和RIP的藥物相

8、互作用 患者合用苯海拉明前后，RIP的C<,max><'ss>、C<,min><'ss>、AUC<,0-12><'ss>、AUCC<,0～∞><'ss>顯著增加；t<,l／2>和t<,max>沒有顯著性變化。9-OH-RIP和(+)9-OH-RIP的C<,max><'ss>顯著減??；9-OH-RIP及其手性異構(gòu)體其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無顯著性變化。合用苯海拉明后，CYP2D6酶活性改變與RIP的AUC<,0-12><'ss>的改變顯

9、著負(fù)相關(guān)，與9-OH-RIP及其手性異構(gòu)體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的改變不相關(guān)。 四、結(jié)論 1． 中國精神分裂癥女患者服用利培酮后，利培酮的藥動(dòng)學(xué)和9-羥基利培酮手性異構(gòu)體的穩(wěn)態(tài)谷濃度與國外文獻(xiàn)報(bào)道相似；9-羥基利培酮手性異構(gòu)體在藥動(dòng)學(xué)上有較大差異。 2． 苯海拉明與利培酮合用產(chǎn)生明顯的藥物動(dòng)力學(xué)相互作用，其原因是苯海拉明抑制體內(nèi)CYP2D6活性。CYP2D6活性下降后，9-OH-RIP和(+)9-OH-RIP的峰濃度