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1、目的:原代分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),研究MSCs治療自身免疫性疾病類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的可行性,探討可能發(fā)揮的作用機制。 方法:貼壁法分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓MSCs,并采用直接免疫熒光標(biāo)記法分析骨髓MSCs的表型;MTT比色法法檢測MSCs對混合淋巴反應(yīng)(MLR)的影響,確定分離培養(yǎng)的大鼠骨髓MSCs免疫抑制功能;收集MSCs上清液(MSCs-SL),MTT比色法法檢測MSCs-SL對MLR以及滑膜細(xì)胞增殖能力
2、的影響;RT-PCR法檢測MSCs-SL對滑膜細(xì)胞的細(xì)胞因子COX-2、MMP-2 mRNA水平的影響。 結(jié)果:貼壁法分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓MSCs操作簡單、易行,對細(xì)胞損傷小,分離獲得的MSCs增殖能力旺盛,傳代后,細(xì)胞短時間內(nèi)貼壁,凍存復(fù)蘇對MSCs的增殖和形態(tài)表型無明顯影響。直接免疫熒光標(biāo)記法分析骨髓MSCs的表型顯示分離培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞是MSCs。研究證實分離培養(yǎng)的MSCs以及MSCs-SL均具有明顯的抑制MLR體系中細(xì)胞增
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