建立大鼠雙側(cè)供腎移植模型及移植腎微淋巴管新生研究.pdf

1、目的：采用在鹽水中端端吻合腎動(dòng)脈、靜脈,建立不阻斷主動(dòng)脈和后腔靜脈血流的雙側(cè)供腎大鼠腎移植模型,在此基礎(chǔ)上觀察移植腎組織的微淋巴管新生(Lymphatic Neoangiogenesis,LN)的生成特點(diǎn),為移植免疫學(xué)研究和慢性移植腎腎病(Chronic allograft nephropathy,CAN)的防治提供免疫學(xué)基礎(chǔ)。 方法： 實(shí)驗(yàn)一：建立不阻斷主動(dòng)脈和后腔靜脈血流的雙側(cè)供腎大鼠腎移植模型,將SD大鼠隨機(jī)分A、

2、B組,A組采用經(jīng)典的血管端端吻合方法,B組采用在鹽水中行腎血管端端吻合方法建立大鼠腎移植模型,對(duì)耗費(fèi)時(shí)間、吻合血管并發(fā)癥等進(jìn)行比較。 實(shí)驗(yàn)二：對(duì)Lewis、F344大鼠進(jìn)行分組,A組Lewis大鼠為空白對(duì)照組；B組為L(zhǎng)ewis大鼠假手術(shù)組,剖腹探查左側(cè)腎臟并骨骼化左腎動(dòng)靜脈；C組為L(zhǎng)ewis-F344大鼠腎移植組,建立慢性排斥反應(yīng)(chronic rejection,CR)模型,于建模后4W、8W、12W時(shí)點(diǎn)切取左腎,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行

3、HE染色以及podoplanin蛋白單抗免疫組化染色,觀察CR模型腎內(nèi)LN密度及LN密度值與CR模型的Banff分級(jí)的關(guān)系。 結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)一:B組中使用方法所耗時(shí)間明顯較A組所耗時(shí)間短,且吻合血管的并發(fā)癥較少；B組中腎動(dòng)、靜脈即時(shí)通暢率分別為85％、90％；移植腎模型穩(wěn)定,大鼠成活良好。 實(shí)驗(yàn)二:C組中LN增殖發(fā)生在移植后4W以內(nèi),在4W-12W時(shí)間段內(nèi),LN的密度值維持在高水平；C組腎皮質(zhì)內(nèi)的LN為A、B組腎皮