pp6068克隆蛋白與BACE1的相互作用.pdf

1、阿爾茨海默氏病(Alzheimer'sdisease，AD)是一種以漸進(jìn)性記憶力喪失和認(rèn)知障礙為主要癥狀的神經(jīng)退行性疾病，在患者腦部出現(xiàn)兩個(gè)明顯的病理組織學(xué)特征：即細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)(neurofibrillarytangle，NFT)和細(xì)胞外形成淀粉樣斑(senileplaque，SP)。研究表明SPs中含有大量的β—淀粉樣蛋白(beta—Amyloidprotein，Aβ)，BACE1(β—siteAPP—cleavingenzy

2、me；APP，amyloidprecursorprotein)被認(rèn)為是Aβ形成的關(guān)鍵酶，已經(jīng)成為目前阿爾茨海默癥研究的熱點(diǎn)之一。但目前對(duì)于BACE1的生理功能和作用機(jī)制仍然缺乏全面的了解。 為了更清楚地認(rèn)識(shí)和了解BACE1在阿爾茨海默癥發(fā)病過(guò)程中的作用，我們實(shí)驗(yàn)室以BACE1的胞內(nèi)端第473位至第501位氨基酸構(gòu)建誘餌蛋白，利用酵母雙雜交的方法在人胎腦cDNA文庫(kù)進(jìn)行篩選，得到一個(gè)能與BACE1相互作用的蛋白：pp6068克隆蛋

3、白。 我們構(gòu)建了pp6068克隆蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)的載體，免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)證明外源性的pp6068克隆蛋白和BACE1在HEK293T細(xì)胞中能夠發(fā)生相互作用。在N2a/APP695細(xì)胞中，pp6068克隆蛋白的過(guò)表達(dá)能夠上調(diào)BACE1的水解產(chǎn)物APP/βCTF和Aβ的蛋白水平，同時(shí)，還能夠下調(diào)α—分泌酶的水解產(chǎn)物sAPPα的蛋白水平。 這些研究說(shuō)明，pp6068克隆蛋白可能參與了BACE1活性的調(diào)節(jié)，影響APP