文蛤糖蛋白MGP-,0501-抗腫瘤作用及其機制研究.pdf

1、從文蛤中分離純化得到一種具有抗腫瘤活性的小分子糖肽，命名為MGP0501(MeretrixmeretrixGlycoPeptide)，SDS-PAGE電泳測定其分子量為15878Da，糖含量55.18％(m/m)，蛋白含量44.82％(m/m)。以溴化二苯偶氮鹽(MTT)比色法檢測MGP0501對9種人源性和1種鼠源性癌細胞株的生長抑制活性，表明MGP0501對人肺癌(A549)、卵巢癌(HO8910)、宮頸癌(Hela)、鼻咽癌(KB

2、)、肝癌(SMMC-7721)生長均有很強的抑制作用，對鼠源性癌細胞株(B16)抑制性最強，并呈量效關(guān)系。此外，MGP0501對正常脾淋巴細胞無抑制作用，表現(xiàn)了對癌細胞的特異性，可以選擇性地殺傷腫瘤細胞，而不影響正常體細胞的生長。MGP0501還能抑制腫瘤細胞與基底膜成分的粘附，低劑量(9.5μg/mL)的抑制率近50％，可見MGP0501具有較好的抗腫瘤細胞生長和轉(zhuǎn)移的作用。對荷S180肉瘤、Heps瘤、EAC腹水瘤小鼠抗腫瘤實驗表明

3、MGP0501具有很好的抗S180肉瘤和Heps瘤生長，6mg/kg劑量時S180抑瘤率為68.50％，Heps抑瘤率為66.43％。腫瘤組織切片觀察表明MGP0501能夠抑制腫瘤細胞核分裂。 本文還考察了MGP0501抗腫瘤機制研究。采用透射電鏡觀察細胞形態(tài)學變化、DNA梯度瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、流式細胞檢測等技術(shù)觀察MGP0501誘導腫瘤細胞凋亡的過程。并采用免疫組化法分析MGP0501誘導腫瘤細胞凋亡的分子機制。最后檢測給藥

4、小鼠肝臟和腫瘤細胞的抗氧化能力，觀察MGP0501的抗氧化與抗腫瘤之間的關(guān)系；實驗結(jié)果表明，MGP0501能夠顯著誘導腫瘤細胞發(fā)生凋亡，可見細胞膜破損、細胞變性或出現(xiàn)縊痕、透明度和亮度降低、細胞增殖作用減低、活細胞數(shù)減少；電鏡下觀察，細胞皺縮變小，胞漿致密，核固縮，染色質(zhì)濃集、邊聚、胞質(zhì)空泡化等細胞凋亡的形態(tài)學特征，其DNA電泳呈現(xiàn)典型的梯形凋亡特征；流式細胞分析顯示，MGP0501的作用后，即在G0-G1間明顯出現(xiàn)一個凋亡峰，細胞周期