還原型谷胱甘肽對(duì)大鼠腸缺血再灌注抗氧化能力影響的研究.pdf

1、前言本研究采取大鼠模型，主要根據(jù)還原型谷胱甘肽的具有抗氧化，清除氧自由基作用，討論在腸缺血再灌注損傷中腸組織MDA、SOD、血清TNF-a含量變化、小腸組織病理學(xué)的改變及還原型谷胱甘肽對(duì)其的影響，探討還原型谷胱甘肽是否能減輕腸缺血再灌注損傷及其機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)材料與方法36只SD大白鼠體重250g-270g，用10％的水合氯醛，按3ml/kg麻醉后，隨機(jī)分為A，B，C，D，E，F(xiàn)六組，每組6只，即A假手術(shù)60分鐘(n=6開(kāi)腹假手術(shù)，

2、0.3ml的生理鹽水，在相當(dāng)于再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推，在相當(dāng)于再灌注60分鐘取材)，B缺血—再灌注對(duì)照60分鐘(n=6開(kāi)腹手術(shù)，腸缺血60分鐘，再灌注60分鐘，0.3ml的生理鹽水，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，C谷胱甘肽治療60分鐘(n=6開(kāi)腹手術(shù)，腸缺血60分鐘再灌注60分鐘，20％谷胱甘肽生理鹽水溶液0.3ml，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，D假手術(shù)120分鐘(n=6開(kāi)腹假手術(shù)，0.3ml的生理鹽水，在相當(dāng)于再灌注前

3、30分鐘頸外靜脈靜推，在相當(dāng)于再灌注120分鐘取材)，E缺血—再灌注對(duì)照120分鐘(n=6開(kāi)腹手術(shù)，腸缺血60分鐘，再灌注120分鐘，0.3ml的生理鹽水，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，F(xiàn)谷胱甘肽治療120分鐘(n=6開(kāi)腹手術(shù)，腸缺血60分鐘再灌注120分鐘，20％谷胱甘肽生理鹽水溶液0.3ml，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)。腸缺血再灌注大鼠模型以?shī)A閉腸系膜上動(dòng)脈造成腸缺血60分鐘，而后再灌注60分鐘或120分鐘。檢測(cè)腸組織SO

4、D、MDA水平、血清TNF-a水平、腸組織病理學(xué)研究，HE染色法，光鏡觀察，腸組織HE染色后腸粘膜損傷按Chiu氏六級(jí)評(píng)分評(píng)價(jià)。應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.腸缺血再灌注損傷引起腸組織SOD，MDA，血TNF-α及腸組織病理的變化： 腸缺血再灌注60分鐘及120分鐘均引起腸組織SOD，MDA，血TNF-α，腸組織病理的變化，與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的假手術(shù)組相比，各時(shí)相點(diǎn)SOD值顯著降低(P＜0.01，

5、P＜0.01)，MDA顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)，血TNF-α顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)，腸組織損傷顯著加重(P＜0.01，P＜0.01)，其中與缺血再灌注60分鐘組相比，缺血再灌注120分鐘組腸組織SOD活力降低更顯著(P＜0.05)，MDA升高更顯著(P＜0.01)，血TNF-α升高更顯著(P＜0.01)，腸組織損傷更為加重(P＜0.01)。 2.谷胱甘肽治療60分鐘組及谷胱甘肽治療120分鐘組對(duì)腸組

6、織SOD、MDA、血TNF-α及腸組織病理?yè)p傷的影響： 與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)缺血再灌注對(duì)照組相比，谷胱甘肽給藥組腸組織SOD值顯著高于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的對(duì)照組(P＜0.01，P＜0.01)，腸組織MDA值顯著低于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.01)。谷胱甘肽給藥組門靜脈血TNF-α值顯著低于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的對(duì)照組(P＜0.01，P＜0.01)。而谷胱甘肽給藥組與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)對(duì)照組相比絨毛損傷程度明顯減輕(P＜0.01，P＜0.01)。

7、 討論SOD、MDA是測(cè)定IRI損傷常用的指標(biāo)，SOD活力的高低反映了機(jī)體清除氧自由基的能力[6]，MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的代謝產(chǎn)物，其含量多少在一定程度上反映了氧自由基對(duì)組織損傷的程度。TNF-α是由激活的單核—巨噬細(xì)胞系統(tǒng)產(chǎn)生的一種內(nèi)源性細(xì)胞調(diào)節(jié)因子，具有多種生物學(xué)作用，腸缺血再灌注后，機(jī)體單核—巨噬細(xì)胞系統(tǒng)可由靜止?fàn)顟B(tài)轉(zhuǎn)變到活化狀態(tài)。還原型谷胱甘肽(GSH)是人類細(xì)胞中自然合成的一種肽，含有巰基(-SH)，有抗氧化作用，廣泛分布

8、于機(jī)體各器官內(nèi)，為維持細(xì)胞生物功能呈有重要作用。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明腸缺血再灌注60分鐘及120分鐘與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的假手術(shù)組相比，各時(shí)相點(diǎn)SOD值顯著降低，MDA顯著升高，血TNF-α顯著升高，腸組織損傷顯著加重，說(shuō)明氧自由基對(duì)腸IRI組織造成損傷。其中與缺血再灌注60分鐘組相比，缺血再灌注120分鐘組腸組織損傷更為加重。 谷胱甘肽治療60分鐘組及谷胱甘肽治療120分鐘組與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)缺血再灌注對(duì)照組相比，谷胱甘肽給藥組腸組織S

9、OD值顯著升高，MDA值顯著降低。提示在腸缺血再灌注損傷中谷胱甘肽通過(guò)清除氧自由基，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化程度，保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，谷胱甘肽給藥組門靜脈血TNF-α值顯著低于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)的對(duì)照組。說(shuō)明谷胱甘肽抑制TNF-α的生成，減輕組織和器官的損傷。而谷胱甘肽給藥組與相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)對(duì)照組相比絨毛損傷程度明顯減輕，說(shuō)明谷胱甘肽的應(yīng)用能減輕腸缺血再灌注損傷后的腸黏膜屏障的破壞。 結(jié)論腸缺血再灌注可以引起腸組織的損傷，并可引起腸組織形態(tài)學(xué)改變。其中腸I