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文檔簡介
1、以往的研究證實金雀異黃素能抑制視網(wǎng)膜色素上皮(retinalpigment epithelium,RPE)細(xì)胞的增殖,然而缺氧條件下金雀異黃素(genistein,Gen)對培養(yǎng)視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigmentepithelium,RPE)細(xì)胞生長的影響以及可能作用機(jī)制還不明確。本研究以常氧條件為對照,建立人RPE細(xì)胞的缺氧模型,Gen分別以25、50、100uM(組)的藥物濃度作用于細(xì)胞;甲基噻唑基四唑(methylth
2、iazolyltetrazolium,MTT)測定法測定2 4小時細(xì)胞活力(以吸光度A值表示);流式細(xì)胞儀檢測各細(xì)胞周期細(xì)胞生長情況;免疫印記檢測增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、細(xì)胞周期蛋白D 1(CyclinDl)、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶 (extracellular signal-regulatedkinases,ERKs)、大分子MAPK (big mitogen-activated proteinkinases-1,BMK1))、c-J
3、un氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)以及p38MAPK的表達(dá)。結(jié)果表明與對照組比,缺氧引起細(xì)胞活力,S期細(xì)胞數(shù),PCNA、CyclinD1蛋白的表達(dá)增加,細(xì)胞表現(xiàn)為增殖。加Gen組細(xì)胞活力下降,細(xì)胞在G1期和S期被阻滯,PCNA、CyclinD1蛋白表達(dá)下降,細(xì)胞增殖被抑制。隨著Gen濃度的增高,活力逐漸降低,PCNA和CyclinD1蛋白表達(dá)逐漸下降。缺氧引起p-ERK1/2蛋白表達(dá)下降,Gen組
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