硫酸化修飾對白術(shù)多糖理化性質(zhì)及生物活性影響的研究.pdf

1、采用醇提方法，從中藥白術(shù)根莖中提取水溶性白術(shù)粗多糖，粗多糖經(jīng)凍融、醇沉分級(jí)，凝膠層析，蛋白酶法和Sevag法聯(lián)合脫蛋白得到單一級(jí)分AMP，經(jīng)HPLC測得平均分子量為8374Da。G．C分析表明其單糖組成為：Glc、Gal、Rha和Man，摩爾比為7.36：1.00：3.05：1.52，并對其進(jìn)行了Sephadex G-75層析柱分析和HPLC分析，證明AMP為純度較好的多糖樣品，進(jìn)而采用氯磺酸-吡啶法，制備得到三種不同硫酸化程度的白術(shù)多

2、糖S<,1>-AMP、S<,2>-AMP、S<,3>-AMP。 三種硫酸化白術(shù)多糖采用紅外光譜，離子色譜，凝膠層析，比旋光度，核磁共振進(jìn)行理化性質(zhì)分析。結(jié)果表明，隨著氯磺酸與多糖自由羥基摩爾比例的增加，硫酸化白術(shù)多糖的取代度隨之增加；但當(dāng)氯磺酸用量較高時(shí)，取代度提高的同時(shí)，產(chǎn)物收率降低，分子量減小。硫酸基的引入，使白術(shù)多糖分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)和高級(jí)結(jié)構(gòu)都發(fā)生了變化，但沒有改變白術(shù)多糖的構(gòu)型。 通過APTT、PT檢測抗凝血活性，

3、結(jié)果表明白術(shù)多糖AMP沒有抗凝血活性，而硫酸化白術(shù)多糖隨著取代度的增加，S<,1>-AMP，S<,2>-AMP，S<,3>-AMP的APTT、PT也隨之增加，并且對濃度存在依賴關(guān)系，說明硫酸化白術(shù)多糖具有抗凝血作用，主要是影響內(nèi)源性凝血途徑，對外源性凝血途徑影響較弱，僅在較大劑量時(shí)對PT有顯著的延長作用。結(jié)構(gòu)中的硫酸基是硫酸化白術(shù)多糖產(chǎn)生抗凝血活性的重要結(jié)構(gòu)基團(tuán)。 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)表明：AMP和S<,1>-AMP在體外具有促進(jìn)小