Beclin1在膀胱癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景&目的：
　　隨著目前對(duì)膀胱癌研究的不斷深入，膀胱癌的治療手段不斷的完善，膀胱癌的預(yù)后已有所改觀。據(jù)2005年統(tǒng)計(jì)，尿路膀胱細(xì)胞癌在中國常見腫瘤中居第十位，統(tǒng)計(jì)約有17365人死與膀胱癌，并且從1991年至2005年呈持續(xù)增長(zhǎng)狀態(tài)。膀胱癌發(fā)病率隨著年齡增長(zhǎng)而增加，高峰年齡期在50-70歲之間，且男性患病率是女性的三倍。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，環(huán)境污染加劇，人類生活方式的改變等因素的影響，膀胱癌的患病率仍在不斷升高，是國內(nèi)泌尿系腫瘤中發(fā)

2、病率最高、危害最大的惡性腫瘤。分子生物學(xué)研究證實(shí)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟的過程，其間涉及抑癌基因的失活和原癌基因的激活等，而關(guān)于膀胱癌發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制尚不十分清楚，且缺乏有效的早期診斷和預(yù)后判斷的標(biāo)記物。Beclin1基因是自噬相關(guān)基因ATG6的源物，其編碼的蛋白在自噬體的形成及膜蛋白的定位中占主導(dǎo)地位，并且在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用。國內(nèi)外已有其在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、大腸癌、宮頸癌等腫瘤中的作用的相關(guān)研究，已

3、證實(shí)其在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起非常重要的作用，且已被確定為一個(gè)新的候選抑癌基因；提示Beclin1（亦稱BECN1）基因?yàn)橐环浅Ｖ匾囊职┗颍覍?duì)多種腫瘤的預(yù)后判斷有重要作用，成為目前腫瘤研究的熱點(diǎn)之一；但其與膀胱癌關(guān)系的研究在國內(nèi)外尚無報(bào)道。本研究通過測(cè)定自噬基因 Beclin1在膀胱癌組織中的表達(dá)情況，初步探討其在膀胱癌發(fā)生、發(fā)展過程中作用、臨床意義及其相互關(guān)系。
　　材料與方法：
　　選取中山大學(xué)腫瘤防治中心與廣州醫(yī)學(xué)

4、院第二附屬醫(yī)院2002年11月至2009年1月期間的127例膀胱癌病例，其中14例留取新鮮冰凍膀胱癌組織及癌旁正常粘膜組織；所有病例均經(jīng)手術(shù)后病理確診為膀胱移行細(xì)胞癌，并且術(shù)前均未進(jìn)行放、化療以及膀胱灌注治療，且具有完整的臨床資料和病理資料。利用免疫組化檢測(cè)127例膀胱癌和20例正常膀胱組織標(biāo)本中beclin1的表達(dá)，用qRT-PCR方法檢測(cè)10對(duì)新鮮冰凍組織中beclin1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平，用Western Blot方法檢測(cè)4對(duì)新鮮

5、冰凍組織中beclin1的蛋白表達(dá)，并且其表達(dá)條帶用Quantity One program(Bio-Rad，Hercules，CA)灰度分析軟件比較膀胱癌組織及癌旁正常組織中Beclin1在蛋白水平表達(dá)的差異，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0軟件包。
　　結(jié)果:
　　1. qRT-PCR檢測(cè)10對(duì)新鮮冰凍膀胱癌與癌旁正常組織，結(jié)果顯示：膀胱癌組織中Beclin1在mRNA轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)明顯低于癌旁正常組織（P=0.0052）

6、。
　　2、Western Blot檢測(cè)示：膀胱癌組織中Beclin1蛋白的表達(dá)明顯低于瘤旁正常組織，并且通過灰度分析證實(shí)其差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的（P=0.029）。
　　3、免疫組化結(jié)果表明Beclin1在膀胱癌組織中低表達(dá)，在正常膀胱組織中高表達(dá)（P<0.0001）。Beclin1在膀胱癌中的表達(dá)水平同性別、年齡、腫瘤數(shù)量、腫瘤大小和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性；而同臨床分期、病理分級(jí)相關(guān)，淺表性（Ta，T1）和浸潤(rùn)性（T

7、2，T3，T4）膀胱癌組織Beclin1高表達(dá)率分別為48.9％、30.5%，P=0.04；G1&G2與G3的Beclin1高表達(dá)率分別為51.0%、28.2%，P=0.010，提示：臨床分期越高、組織分化程度越低，beclin1的表達(dá)水平越低。
　　4、Kaplan-Meier生存分析表明：Beclin1高表達(dá)和低表達(dá)組患者五年生存率分別為88.8%，68.5%，P=0.018；Beclin1高表達(dá)和低表達(dá)組患者五年無病生存率分

8、別為81.9%，59.6%，P=0.031；說明Beclin1表達(dá)越高，膀胱癌患者生存預(yù)后越好。Cox-回歸風(fēng)險(xiǎn)模型分析說明beclin1是膀胱癌一獨(dú)立的生存預(yù)后因素（P=0.005）。
　　結(jié)論：
　　1、Beclin1在膀胱癌組織中表達(dá)水平顯著低于癌旁正常組織的表達(dá)。
　　2、膀胱癌的臨床分期越高、病理分化程度越低，Beclin1的表達(dá)水平越低，提示beclin1在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展中可能起一定作用。
　　3、