Ambral介導(dǎo)的自噬與凋亡在結(jié)腸癌中的研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：E1期：苧Z竺：耋，王]Ambral介導(dǎo)的自噬與凋亡在結(jié)腸癌細(xì)胞中的研究中文摘要Ambr

2、al介導(dǎo)的自噬與凋亡在結(jié)腸癌細(xì)胞中的研究中文摘要中又手葡斐目的：Ambral是一個(gè)與自噬相關(guān)的重要基因，越來越多的研究揭示了Ambral可以通過促進(jìn)自噬從而發(fā)揮的促生存的作用。在Ambral在胚胎干細(xì)胞中可以調(diào)控Beclinl依賴的自噬。然而，Ambral在與結(jié)腸癌細(xì)胞中自噬相關(guān)的信號(hào)通路中扮演何種的角色，這方面的研究仍然未見報(bào)道，在本研究當(dāng)中，我們就Ambral相關(guān)的自噬與凋亡應(yīng)用結(jié)腸癌細(xì)胞株展開討論。方法：1使用人結(jié)腸癌細(xì)胞SW62

3、0，饑餓誘導(dǎo)SW620細(xì)胞株發(fā)生白噬，通過Wsetemblot技術(shù)檢測自噬標(biāo)志性蛋白LC3的表達(dá)，并且采用透射電鏡以及免疫熒光進(jìn)一步確定結(jié)腸癌細(xì)胞株SW620中自噬體的形成，同時(shí)用Westernblot檢測目標(biāo)蛋白Ambral表達(dá)的變化2使用凋亡誘導(dǎo)劑staurosporine(十字胞堿)和etoposide(足葉乙苷)處理SW620細(xì)胞株，檢測Ambral蛋白表達(dá)的變化；使用calpain抑制劑以及caspase抑制劑，運(yùn)用Weste

4、rnblot的方法研究Ambral在SW620細(xì)胞株凋亡時(shí)發(fā)生降解的機(jī)制3使用AmbralsiRNA干擾AmbralRNA后觀察Ambral對(duì)于SW620細(xì)胞株的自噬、凋亡和增殖的作用結(jié)果：1饑餓誘導(dǎo)的SW620結(jié)腸癌細(xì)胞株自噬與Ambral蛋白的表達(dá)成正相關(guān)即自噬過程中Ambral蛋白的表達(dá)增高。2凋亡誘導(dǎo)過程中SW620結(jié)腸癌細(xì)胞株白噬相關(guān)蛋白Ambral被不斷降解，caspase和calpain可能參與了Ambral蛋白的降解。3