EN2在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其與增殖凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　EN2是一種同源異型盒基因,在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá),但其在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用尚不清楚。本研究旨在探討EN2蛋白在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)，并探討其與臨床病理因素的關(guān)系，并進(jìn)一步探討EN2對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖凋亡的影響。
　　方法：
　　收集2012年12月至2013年9月在南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院外科手術(shù)切除的新鮮94例結(jié)腸癌及相應(yīng)癌旁組織，分別用免疫組織化學(xué)和western blot檢測(cè)結(jié)腸癌中EN2的表達(dá)。以化

2、學(xué)合成法合成的兩對(duì)特異性EN2-siRNA，并成功轉(zhuǎn)染至結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)。用Western blot、RT-PCR技術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA后的EN2蛋白的表達(dá)情況，確定抑制效果更佳的siRNA。以MTT法檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖,并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　1）免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)EN2蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿，結(jié)腸癌組織中EN2蛋白的表達(dá)強(qiáng)度65.9％（62/94）明顯高于癌旁組織(P<0.05)。Weste

3、rn blot檢測(cè)結(jié)果與免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果相似。
　　2）通過與臨床病理資料分析，EN2高表達(dá)與腫瘤大小、浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者EN2表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。
　　3）結(jié)腸癌細(xì)胞中EN2呈高表達(dá)。siRNA1干擾效果更明顯，通過轉(zhuǎn)染siRNA1和對(duì)照組，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染48h后,干擾組增殖能力受到明顯抑制(P<0.05);細(xì)胞凋亡率明顯增加(P<0.05)。
　　結(jié)論