Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A誘導(dǎo)小鼠二次心臟移植長期免疫耐受.pdf

1、目的：
　　探討Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A在小鼠心臟二次移植急性排斥反應(yīng)中的作用。
　　方法：
　　構(gòu)建小鼠心臟二次移植模型：初次移植，以Balb／c小鼠為供鼠，C57BL/6小鼠為受鼠，進行腹部心臟移植；二次移植，以同種Balb／c小鼠為供鼠，初次移植后存活的C57BL/6小鼠為受鼠，進行二次頸部心臟移植。然后經(jīng)不同步驟處理，分為四組進行實驗：對照組：初次腹部心臟移植存活小鼠，于初次腹部心臟移植2w后行二次頸

2、部心臟移植,同時予腹腔注射與其他組同劑量的生理鹽水處理；實驗組A，初次腹部心臟移植存活小鼠，于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植，同時予腹腔注射與其他組同劑量的環(huán)孢素A處理（n=6）；實驗組B，初次腹部心臟移植存活小鼠，于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植，同時予腹腔注射與其他組同劑量的Anti-RANTES處理（n=6）；實驗組C，初次腹部心臟移植存活小鼠，于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植，同時予腹腔混合注射與其

3、他組同劑量的環(huán)孢素A和Anti-RANTES處理（n=6）。觀察四組二次移植心臟存活時間;HE染色組織病理學(xué)改變觀察各組異位心臟急性排斥反應(yīng)的程度;Q-PCR檢測二次心臟移植物中RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β基因的相對表達量;ELISA檢測RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β在受鼠血清中的濃度。
　　結(jié)果：
　　在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組，移植心臟的存活時間可

4、達8.58±0.24天，而在對照組、Anti-RANTES組和應(yīng)用環(huán)孢素A組，移植心臟的存活時間分別為(3.1±0.43)、(5.2±0.26)和(5.58±0.20)天(P<0．01)；心臟移植物HE染色可見，在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組，其炎癥細胞的浸潤較對照組、單用Anti-RANTES實驗組A、單環(huán)孢素A實驗組B明顯減少(P<0．01)；Q-PCR的結(jié)果提示，移植心臟內(nèi)RANTES、IL-2、INF-γ的mRNA表

5、達在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯減少，而移植心臟內(nèi)IL-10、TGF-βmRNA的表達在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯增加(P<0．01)；ELISA的結(jié)果提示，移植心臟內(nèi)RANTES、IL-2、INF-γ的血清濃度在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯減少，而移植心臟內(nèi)IL-10、TGF-β血清濃度在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯增加(P<0．01)。

6、
　　結(jié)論：
　　CC族趨化因子配體5（CCL5）RANTES,在小鼠二次心臟移植免疫排斥的誘發(fā)和發(fā)展過程中，起著至關(guān)重要的作用。單用可以Anti-RANTES 或者環(huán)孢素A都可以有效抑制二次心臟移植的急性排斥反應(yīng)，減輕炎癥細胞向移植物聚集、減輕移植物中炎癥細胞因子RANTES、IL-2、INF-γ的分泌而增加抗炎細胞因子IL-10、TGF-β的分泌，從而延長二次移植物的存活時間。但聯(lián)合應(yīng)用Anti-RANTES和