人參環(huán)氧炔醇對體外缺氧損傷Schwann細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：研究人參環(huán)氧炔醇(panaxydol)對體外缺氧損傷的Schwann細(xì)胞生物學(xué)活性、凋亡以及神經(jīng)營養(yǎng)因子(neurotrophic factors，NTFs)表達(dá)、分泌的影響。 方法: 體外建立Schwann細(xì)胞缺氧模型，并通過HE染色、MTT法鑒定缺氧模型；不同濃度的人參環(huán)氧炔醇作用于體外缺氧損傷Schwann細(xì)胞，用MTT法、免疫組化法分別觀察細(xì)胞活力和凋亡蛋白酶的表達(dá)，用免疫組化法、計算機(jī)圖像分析和ELISA法觀察其

2、對Schwann細(xì)胞神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)分泌的影響，同時用RT-PCR法檢測NGF、BDNFmRNA的變化。 結(jié)果: 通過HE染色觀察缺氧對Schwann細(xì)胞形態(tài)的變化、MTT檢測缺氧對細(xì)胞活力的影響，結(jié)果顯示缺氧15分鐘對細(xì)胞有可逆性損傷，不會致細(xì)胞完全死亡。MTT檢測細(xì)胞活力顯示人參環(huán)氧炔醇在5.0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L藥物濃度時對缺氧損傷的Schwann細(xì)胞有保護(hù)其存活的作用(P<0.05)，10μm

3、ol/L藥物濃度時保護(hù)作用最顯著(P<0.01)；免疫組化法、計算機(jī)圖像分析細(xì)胞內(nèi)NTFs、Caspase-3表達(dá)的相對強(qiáng)度，在10~20umol/L濃度范圍內(nèi)能促進(jìn)細(xì)胞表達(dá)表達(dá)NGF、BDNF(P<0.05)；在5~20umol/L濃度范圍內(nèi)能抑制細(xì)胞表達(dá)Caspase-3，在10μmol/L抑制作用最顯著(P<0.01)；ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NGF分泌量，結(jié)果顯示10μmol/L藥物濃度時能促進(jìn)細(xì)胞分泌NGF(P<0.0

4、5)。RT-PCR檢測顯示人參環(huán)氧炔醇也能促進(jìn)缺氧損傷的SCs NGF、BDNF mRNA的表達(dá)。另外，研究結(jié)果顯示短暫缺氧能促進(jìn)Schwann細(xì)胞高表達(dá)NGF及其mRNA，但降低BDNF及其mRNA的表達(dá)；缺氧也能促進(jìn)Schwann細(xì)胞分泌NGF。 結(jié)論: 本實(shí)驗(yàn)成功建立了簡單、安全、有效的Schwann細(xì)胞體外缺氧模型。人參環(huán)氧炔醇能明顯抑制缺氧損傷Schwann細(xì)胞表達(dá)凋亡蛋白酶Caspase-3，促進(jìn)Schwann細(xì)胞存