孕激素及孕激素核、膜受體表達(dá)對(duì)SLE外周血單個(gè)核細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種慢性、復(fù)雜的自身免疫性疾病，累及多系統(tǒng)器官，對(duì)人類的危害較大。SLE的發(fā)病機(jī)理尚不明確，但SLE與性激素有關(guān)，女性發(fā)病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于男性。近年來(lái)，大量研究資料表明孕激素是一種免疫調(diào)節(jié)分子，具有免疫調(diào)節(jié)功能，可抑制Th1細(xì)胞反應(yīng)，誘導(dǎo)Th2細(xì)胞反應(yīng)及促進(jìn)不對(duì)稱抗體的產(chǎn)生。本課題通過(guò)對(duì)SLE患者血漿雌孕激素水平、外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)孕激素核/膜受體表達(dá)情況的檢測(cè)，并依據(jù)此兩種受體的不同表達(dá)結(jié)果對(duì)SL

2、E PBMCs進(jìn)行分組，以不同濃度孕激素對(duì)各組進(jìn)行干預(yù)，并檢測(cè)其相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)情況等一系列實(shí)驗(yàn)，最終旨在闡述孕激素在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:收集48例女性SLE患者和26例健康女性肝素抗凝的空腹靜脈血，并根據(jù)SLE疾病活動(dòng)性指標(biāo)(SLEDAI-2000)對(duì)48例SLE患者進(jìn)行臨床分期。Ficoll密度梯度離心法分離血漿及PBMCs，免疫組化法及直接免疫熒光法檢測(cè)SLE患者及26例健康女性PBMCs孕激素核受體

3、(nPR)及孕激素膜受體(mPR)的表達(dá);化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)SLE患者及健康女性血漿雌、孕激素水平;體外培養(yǎng)SLE患者nPR和/或mPR表達(dá)陽(yáng)性的PBMCs，以不同濃度孕激素(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)進(jìn)行誘導(dǎo)并培養(yǎng)，ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)液IL-2、IFN-γ、IL-10因子的表達(dá)。利用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析SLEDAI臨床與實(shí)驗(yàn)室各指標(biāo)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.SLE患者及健康女性血

4、漿雌孕激素水平 SLE疾病活動(dòng)期血漿孕酮較健康女性低(P＜0.05)，SLE疾病活動(dòng)期雌二醇較穩(wěn)定期及健康女性高（P＜0.05）。
　　2.PBMCs中PR的表達(dá)情況48例SLE病例中nPR+或/和mPR+為34/48(70.83％)，高于26例女性健康組11/26(42.31％)，P＜0.05;SLE活動(dòng)期組nPR+或/和mPR+為18/20(90.00％)高于女性健康組，P＜0.05; SLE活動(dòng)期亦高于穩(wěn)定期16/28(57

5、.14％)，P＜0.05。
　　3.不同濃度Pg對(duì)體外培養(yǎng)的PBMCs IL-10、IL-2、IFN-γ表達(dá)的影響孕激素濃度≥1×10-7mol/L時(shí)，上調(diào)nPR+PBMCs的IL-10因子表達(dá)(P＜0.05)，下調(diào)IFN-γ因子表達(dá)(P＜0.05)，且下調(diào)nPR+mPR+BPBMCs的IFN-γ因子表達(dá)(P＜0.05);孕激素濃度為1×10-6mol/L時(shí)，上調(diào)mPR+PBMCs的IL-10因子表達(dá)(P＜0.05)，而下調(diào)nPR

6、+PBMCs的IL-2因子表達(dá)（P＜0.05）。其余組與相應(yīng)對(duì)照組均無(wú)顯著差異。
　　結(jié)論:
　　1.SLE患者血漿存在雌、孕激素水平失衡，疾病活動(dòng)期血清雌激素水平增加，而孕激素水平下降，提示SLE疾病活動(dòng)性與雌孕激素異常有關(guān)。
　　2.SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞孕激素核、膜受體表達(dá)增強(qiáng)，總表達(dá)率高于健康女性，疾病活動(dòng)期表達(dá)亦高于穩(wěn)定期。提示孕激素核及膜受體在SLE發(fā)病機(jī)制中具有一定的意義，且可作為判斷SLE疾病活動(dòng)性