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文檔簡介
1、目的:應用RNA干擾(RNAi)技術抑制B系惡性淋巴瘤細胞株中血管內皮生長因子(VEGF)的表達,研究VEGF對B系惡性淋巴瘤生物學行為的影響。
方法:根據(jù)靶基因序列設計的原則,設計三對針對VEGF的siRNA序列,經脂質體Lipofectamine2000轉染至B系惡性淋巴瘤細胞Namalwa細胞。鏡下觀察轉染效率,采用RT-PCR、Western blot方法檢測轉染后B系惡性淋瘤細胞中VEGF mRNA和蛋白的表達,用T
2、ranswell侵襲小室模型、MTT觀察轉染后B系侵襲性淋巴瘤Namalwa細胞惡性生物學行為的變化。
結果:在所設計的三對靶位點 siRNA序列中只有 siRNA-2組與陰性對照序列組siRNA以及正常組兩兩相比有統(tǒng)計學意義(p<0.01),明顯抑制Namalwa細胞的侵襲能力,使 VEGF mRNA及其蛋白的表達明顯減少;而作為陰性對照序列組 siRNA(siRNA-NC)組以及正常組則沒有上述效應。
結論:通過
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