靶向siRNA阻斷Wnt-β-catenin信號(hào)通路對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞VEGF和MMP-9表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)觀察人子宮內(nèi)膜異位癥在位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(endometrial stroma cell，ESC)β-catenin的表達(dá)及利用siRNA(small interfering RNA，siRNA)靶向沉默β-catenin基因以阻斷Wnt/β-catenin信號(hào)通路來(lái)觀察靶基因血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelial growth factor，VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matriXmetalloprot

2、einase-9，MMP-9)表達(dá)的變化，探討Wnt/β-catenin信號(hào)通路在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生機(jī)制中的作用。
　　 方法：采用隨機(jī)、對(duì)照設(shè)計(jì)，將體外分離、培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞24例分成3組(n=8)：空白組、陰性熒光組(以含陰性熒光siRNA 100pmol和脂質(zhì)體lip2000 5μl的混合物轉(zhuǎn)染)以及siRNA干擾組(以含β-catenin siRNA 100pmol和脂質(zhì)體lip2000 5μl的混合

3、物轉(zhuǎn)染)，并以非子宮內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞10例作為正常對(duì)照組。利用Real time RT-PCR和western blot方法分別檢測(cè)子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜空白組和非子宮內(nèi)膜異位癥正常對(duì)照組β-catenin的表達(dá)。轉(zhuǎn)染24h后，用以上方法分別檢測(cè)子宮內(nèi)膜異位癥空白組、陰性熒光組和siRNA干擾組β-catenin、VEGF以及MMP-9的表達(dá)。
　　 結(jié)果：子宮內(nèi)膜異位癥空白組β-catenin mRNA和蛋白的表達(dá)明

4、顯高于非子宮內(nèi)膜異位癥正常對(duì)照組(P＜0.05)。子宮內(nèi)膜異位癥siRNA干擾組β-catenin、VEGF以及MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá)明顯低于空白組和陰性熒光組(P＜0.05)，而空白組與陰性熒光組之間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞β-catenin的表達(dá)明顯高于非子宮內(nèi)膜異位癥患者，阻斷Wnt/β-catenin信號(hào)通路后，其靶基因VEGF、MMP-9的表達(dá)明顯受到抑制。因此