靶向siRNA阻斷Wnt-β-catenin信號通路對子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠模型異位子宮內(nèi)膜VEGF和MMP-9表達(dá)及血管生成的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：利用siRNA載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)靶向沉默β-catenin以阻斷Wnt/β-catenin信號通路，觀察對子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）裸鼠模型異位子宮內(nèi)膜血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelial growth factor，VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matriXmetalloproteinases-9，MMP-9）表達(dá)及血管生成的影響，探討Wnt/β-catenin信號通路促進(jìn)異位內(nèi)膜組織粘附、侵襲和血管生

2、成的作用。
　　 方法：采用人子宮內(nèi)膜異體移植方法構(gòu)建子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）裸鼠模型，將18只內(nèi)異癥裸鼠隨機(jī)分為3組（n=6）：siRNA干擾組、陰性對照組和空白對照組，每日分別腹腔注射100μl siRNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物（含β-catenin siRNA 3 ug和轉(zhuǎn)染試劑7.5 ug）、陰性對照轉(zhuǎn)染復(fù)合物（含陰性對照siRNA 3ug和轉(zhuǎn)染試劑7.5 ug）和空白對照組混合液（含轉(zhuǎn)染試劑7.5 ug）一次，共注射5次。末次腹腔

3、注射后24h斷頸處死裸鼠，觀察盆、腹腔病灶形成情況，取異位病灶標(biāo)本。Real time RT-PCR和免疫組織化學(xué)檢測異位內(nèi)膜組織β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá)。免疫組織化學(xué)檢測裸鼠模型異位內(nèi)膜組織微血管密度（microvessel density，MVD）。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)裸鼠共20只，18只成模成活。Real time RT-PCR結(jié)果顯示，與陰性對照組和空白對照組相比，siRNA干擾組β-

4、catenin、VEGF和MMP-9表達(dá)明顯低于陰性對照組和空白對照組（p<0.05），而后兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。免疫組化結(jié)果顯示，siRNA干擾組β-catenin、VEGF和MMP-9表達(dá)明顯減弱，并低于陰性對照組和空白對照組（p<0.05），而后兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。siRNA干擾組MVD低于陰性對照組和空白對照組（p<0.05）。
　　 結(jié)論：阻斷Wnt/β-catenin信號通路

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